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在生物技術(shù)研究(抗體藥物開(kāi)發(fā)、蛋白研究等)中，常常需要使用到穩定細胞株的構建來(lái)提升蛋白高親和力和批次一致性。采用穩定細胞株構建能夠提供可靠的平臺，更是在生物制藥和基因治療等領(lǐng)域有著(zhù)廣泛的使用。下面，普健生物具體和大家詳細介紹穩定細胞株的構建。
那么，什么是穩定細胞株呢?穩定細胞株就是通過(guò)基因工程將外源基因引入到宿主細胞中，然后通過(guò)培養、篩選等重復操作，篩選出能夠重復制備目標蛋白的細胞群體。
在穩定細胞株構建的過(guò)程中，有兩項核心步驟需要特別注意，分別是宿主細胞的選擇以及表達載體的構建，只有做好了這兩方面的工作，才能更好地進(jìn)行細胞株的構建。
宿主細胞的選擇：常用的宿主細胞較多，比如CHO細胞、HEK細胞等，需要結合宿主細胞的生長(cháng)特性、表達水平以及生產(chǎn)成本等綜合考慮;
表達載體的構建：其實(shí)就是將目標基因導入到宿主細胞中的過(guò)程。常見(jiàn)的表達載體主要包含目標基因、選擇基因、調控原件等，主要目的就是確保目的基因的穩定表達;
穩定細胞株構建的方法主要有兩種：質(zhì)粒穩定細胞系以及基因整合穩定細胞系。
質(zhì)粒穩定細胞株構建的流程如下：
1、宿主選擇。選擇合適的宿主來(lái)進(jìn)行進(jìn)一步的細胞株構建;
2、載體構建。通過(guò)質(zhì)粒來(lái)構建載體;
3、細胞轉染。將構建好的質(zhì)粒轉染到宿主細胞內;
4、細胞株篩選。通過(guò)培養及篩選，重復操作多次后，篩選出合適的細胞株;
基因組整合穩定細胞株構建的流程如下：
1、選擇合適的細胞株。選擇出合適的細胞作為宿主;
2、構建合適的載體。整合載體，將目標基因整合到宿主中;
3、細胞轉染。將構建出來(lái)的載體導入到宿主細胞中;
4、篩選細胞系。通過(guò)標記基因進(jìn)行細胞系的篩選和擴增;
穩定細胞株的優(yōu)勢：
1、實(shí)現持久表達。穩定細胞株能夠長(cháng)久且穩定地表達目標蛋白;
2、更高的可控性?？梢酝ㄟ^(guò)調控原件來(lái)時(shí)間對目的基因的調控;
3、實(shí)現大規模生產(chǎn)。適合用于大規模生產(chǎn);
穩定細胞株的構建在生物研究以及應用上有著(zhù)廣泛的應用，因為其能夠實(shí)現持久性表達，而且能夠實(shí)現大規模生產(chǎn)，使得其得到非常廣泛的使用。當然了，因為其技術(shù)要求較高，而且制備周期非常的長(cháng)，所以，對于一些蛋白制備續期來(lái)說(shuō)，不適合使用。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供穩定細胞株構建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
