1.載體構建
(1)可將cDNA克隆至客戶(hù)或者普健生物提供的哺乳細胞的表達載體中
(2)可在表達載體中添加分泌信號肽和純化標簽,促進(jìn)蛋白分泌表達及滿(mǎn)足一步親和純化的需求
(3)能生產(chǎn)并鑒定高效穩定細胞系,適合大規模發(fā)酵生產(chǎn)
2.穩定基因表達符合長(cháng)期生產(chǎn)需求,整個(gè)實(shí)驗操作流程提供長(cháng)期穩定及規??烧{的蛋白生產(chǎn)
3.瞬時(shí)表達(TGE)
(1)與穩定基因表達相比,TGE主要適用于短期內制備重組蛋白,一般在10天內即可快速轉染,無(wú)需質(zhì)粒DNA的遺傳性選擇
(2)普健生物的瞬時(shí)表達使用懸浮細胞,能夠完成毫升到100L的體積的蛋白表達
4.工藝過(guò)程開(kāi)發(fā)及擴大規模。普健生物能夠優(yōu)化表達過(guò)程以及表達產(chǎn)物,預測細胞表達量,摸索發(fā)酵罐發(fā)酵條件,適合大規模發(fā)酵生產(chǎn)
5.純化:普健生物擁有完善的蛋白純化系統,親和純化,凝膠過(guò)濾,離子交換及疏水層析等純化方法,能夠完成各類(lèi)型蛋白的純化,以及純化工藝的摸索
普健生物提供表達載體構建、瞬時(shí)轉染、表達測試及大規模動(dòng)物細胞發(fā)酵和蛋白純化等一站式蛋白技術(shù)服務(wù)。
表達方式 |
細胞 |
瞬時(shí)表達 |
HEK293,HEK293細胞來(lái)源于293細胞系,采用無(wú)血清懸浮培養CHO-S,CHO-S細胞是來(lái)自中國倉鼠卵巢細胞的克隆分離株,被馴化為無(wú)血清懸浮培養 |
穩定表達 |
CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而來(lái),該細胞株培養條件簡(jiǎn)單、貼壁強度適中,比較容易轉染 |
穩定細胞株構建 |
DG44,DG44 細胞(二氫葉酸還原酶缺陷型 , DHFR-)由中國倉鼠卵巢(CHO)細胞衍生而來(lái),常用于構建適合重組蛋白生產(chǎn)的細胞系。DG44細胞篩選和共擴增標記是DHFR基因(dhfr) |
表達載體:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等