穩定細胞株構建

細胞轉染，是將外源分子(如 DNA,RNA 等)導入真核細胞中的一種技術(shù);

轉染分為：瞬時(shí)轉染和穩定轉染

瞬時(shí)轉染：指外源 DNA 或 RNA 轉入宿主細胞后不整合到宿主染色體中進(jìn)行外源目的基因的表達

穩定轉染：指外源 DNA 轉入宿主細胞后將外源目的基因整合到宿主染色體中進(jìn)行表達

穩定轉染的特點(diǎn)：

1. 目的基因整合到染色體上，需要使用線(xiàn)性 DNA(線(xiàn)性 DNA 雖然比超螺旋狀的 DNA 轉入量低，但整合率高)

2. 外源 DNA 整合到宿主細胞染色體中大約為 1%，通常需要通過(guò)一些選擇性標記反復篩選，才能得到穩定轉染的同源細胞系

3. 隨宿主細胞基因組復制、轉錄、翻譯，并被穩定遺傳

4. 用于獲得穩定表達的外源基因的單細胞克?。喝绱笠幠５鞍踪|(zhì)的合成，長(cháng)期的藥理學(xué)研究遺傳機制的研究等

穩定細胞株：一般是將外源 DNA 克隆到具有某種抗性或者選擇基因的載體上，載體被轉染到宿主細胞并整合到染色體中，用載體中所含的選擇標志進(jìn)行篩選，篩選得到可穩定表達目的蛋白的細胞株

穩定細胞株構建流程

高質(zhì)：外源基因嚴格鑒定，細胞來(lái)源清晰，無(wú)污染

高產(chǎn)：重組蛋白 / 抗體表達量可快速優(yōu)化至 2g/L 以上穩定表達

穩定：獨有的 GS 穩轉系列載體配合 MSX 藥物篩選，實(shí)現穩定傳代 15 代以上

快速：篩選高產(chǎn)細胞株，周期短至 3 個(gè)月

靈活定制：可針對重組蛋白 / 抗體全長(cháng)或片段進(jìn)行個(gè)性化表達

經(jīng)驗豐富：專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團隊，已成功為國內外多家醫藥公司和研究單位構建交付穩定細胞株

多篩選系統：G418/ 潮霉素 / 嘌呤霉素篩選系統，GS/DHFR 雙基因篩選系統等

構建生產(chǎn)重組抗體的CHO穩定細胞株