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大腸桿菌表達系統具有遺傳背景清晰，培養周期短，易于放大生產(chǎn)，抗污染能力強等諸多優(yōu)點(diǎn)，是目前應用最為廣泛的表達系統之一。普健生物經(jīng)過(guò)十多年的打磨，建立了3H(High through、High efficiency、High quality) 大腸桿菌表達系統，平臺的表達成功率大于95%;獨有的表達純化以及復性平臺，已成功交付上萬(wàn)例大腸桿菌表達服務(wù)項目。
大腸桿菌表達系統具有遺傳背景清晰，培養周期短，易于放大生產(chǎn)，抗污染能力強等諸多優(yōu)點(diǎn)，是目前應用最為廣泛的表達系統之一。普健生物經(jīng)過(guò)十多年的打磨，建立了3H(High through、High efficiency、High quality) 大腸桿菌表達系統，平臺的表達成功率大于95%;獨有的表達純化以及復性平臺，已成功交付上萬(wàn)例大腸桿菌表達服務(wù)項目。
1. 普健生物具有十幾年的蛋白表達經(jīng)驗，15臺中大型微生物培養搖床及發(fā)酵設備、12臺超聲破碎儀、中試型高壓均質(zhì)儀等配套設備，可以實(shí)現高通量，大規模大腸桿菌表達生產(chǎn)
2. 具有多種大腸桿菌表達載體pET系列、pGEX系列等;多種表達宿主：標準表達菌株、可增強蛋白表達的菌株T7E、表達毒性蛋白的C41、增強蛋白可溶性表達的超低溫菌株Arctic、以及其它經(jīng)過(guò)AtaGenix優(yōu)化改造的菌株;通過(guò)不同載體和菌株的優(yōu)化組合，可以實(shí)現蛋白的高效表達，蛋白表達成功率超過(guò)95%
3. 普健生物具有完善的大腸桿菌表達、純化、內毒素控制生產(chǎn)線(xiàn)，可以生產(chǎn)高質(zhì)量蛋白，用于細胞活性實(shí)驗，動(dòng)物實(shí)驗等，滿(mǎn)足高質(zhì)量的蛋白使用需求
服務(wù)流程
大腸桿菌表達蛋白A
1.表達體系優(yōu)化：包括宿主菌、誘導溫度、誘導時(shí)間、誘導劑的濃度及培養基。
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宿主菌 |
誘導溫度 |
誘導時(shí)間 |
誘導劑 |
培養基 |
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T7E,BL21,C41,Arctic |
30℃/37℃ |
1h/4h |
IPTG |
LB/自誘導培養基 |
蛋白A的搖瓶表達量為8 mg/L, 隨后進(jìn)行了發(fā)酵條件的優(yōu)化，包括培養基成分的優(yōu)化、分批及補料的測試，70 L 分批發(fā)酵的表達量為60 mg/L。
2.3C酶去除蛋白MAT標簽，具體結果如圖3、圖4所示
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