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昆蟲(chóng)表達系統
昆蟲(chóng)表達系統，尤其以桿狀病毒表達系統（Baculovirus Expression Vector System, BEVS）為代表，已經(jīng)成為一種廣泛應用的異源蛋白生產(chǎn)手段。桿狀病毒感染昆蟲(chóng)細胞后，其基因組上的外源基因在病毒復制過(guò)程中被轉錄和翻譯，從而高效表達目標蛋白。這類(lèi)系統不僅能夠高效表達各種類(lèi)型的目標蛋白，而且在蛋白后修飾、規?；a(chǎn)等方面展現出獨特的優(yōu)勢。
1）高級后修飾能力：與原核表達系統如大腸桿菌相比，昆蟲(chóng)細胞能夠執行復雜的后修飾過(guò)程，包括糖基化、磷酸化、二硫鍵形成等，這對于需要特定翻譯后修飾以維持功能的蛋白質(zhì)至關(guān)重要。
2）高表達水平：BEVS能夠驅動(dòng)高水平的蛋白表達，部分情況下可達每升培養液數克的濃度，滿(mǎn)足工業(yè)化生產(chǎn)的要求。
3）易于放大與操作：昆蟲(chóng)細胞，如SF9和High Five細胞，能夠在搖瓶、攪拌罐等多種培養體系中良好生長(cháng)，便于從小規模試驗快速過(guò)渡到大規模生產(chǎn)。
4）安全性與合規性：昆蟲(chóng)細胞和桿狀病毒對哺乳動(dòng)物沒(méi)有致病性，這減少了生物安全風(fēng)險，同時(shí)也意味著(zhù)相關(guān)產(chǎn)品較容易通過(guò)藥品監管審查。
5）宿主范圍廣泛：除了傳統的昆蟲(chóng)細胞系之外，BEVS也成功應用于哺乳動(dòng)物細胞、植物細胞乃至酵母中，顯示出了極大的靈活性和通用性。
應用場(chǎng)景
疫苗生產(chǎn)：桿狀病毒/昆蟲(chóng)細胞系統常用于生產(chǎn)重組病毒樣顆粒（VLPs）、亞單位疫苗等，如流感、HPV疫苗的部分成分。
生物制藥：包括抗體、酶、生長(cháng)因子等各種治療性蛋白的生產(chǎn)。
基礎研究：作為研究信號傳導、蛋白質(zhì)互作等功能的工具，昆蟲(chóng)細胞提供了接近哺乳動(dòng)物細胞的表達環(huán)境。
農業(yè)生物技術(shù)：利用轉基因昆蟲(chóng)抵抗害蟲(chóng)侵襲，減少化學(xué)農藥的使用。
普健生物優(yōu)勢：
1.普健生物利用經(jīng)典Bac-to-Bac技術(shù)，打造了一個(gè)快速簡(jiǎn)便高效的桿狀病毒表達平臺;該技術(shù)能夠快速地產(chǎn)生重組病毒，而且不需要繁瑣的空斑分析，大大提高了效率。
2.蛋白生產(chǎn)的周期短，通量大?？梢詫?shí)現細胞從小規模培養到大規模發(fā)酵的過(guò)程，使得蛋白產(chǎn)物甚至可以達到100mg/L的級別。
3.提供免費的病毒粒子擴增和儲存服務(wù)，儲存期長(cháng)達2年。
案例：昆蟲(chóng)-桿狀病毒系統表達大蛋白A(272 KD)
普健采用昆蟲(chóng)-桿狀病毒表達系統，C端融合6*His標簽表達了大小為272 KD的蛋白A，經(jīng)過(guò)P1代表達測試，病毒擴增后分別轉染Sf細胞和Tn細胞測定MOl，選取最佳表達條件進(jìn)行P2代表達測試和200ml表達純化，最終得到的蛋白A純度90%，產(chǎn)量5mq兒。
圖 蛋白A P1代表達純化測試結果(還原SDS-PAGE)
A.考馬斯亮藍染色；B.WB(ECL發(fā)光，抗His標簽抗體)：第一列陰性對照培養基；1和 2轉染的1和2號克??；Medium：培養基；NPE：可溶上清；DPE：沉淀；+:陽(yáng)性對照
昆蟲(chóng)-桿狀病毒表達系統適合純化的蛋白類(lèi)型：
1. 含有基本糖基化需求的蛋白，如某些抗體片段、生長(cháng)因子等。
2. 膜蛋白和跨膜蛋白，因昆蟲(chóng)細胞具有成熟的內質(zhì)網(wǎng)和高爾基體系統，利于膜蛋白的正確折疊和定位。
3. 大規模生產(chǎn)的疫苗抗原，比如HPV病毒樣顆粒、流感病毒表面蛋白等。
4. 需要快速響應和較高產(chǎn)出的蛋白，適合緊急情況下迅速擴大生產(chǎn)規模的需求
普健生物擁有不同生物表達系統，提供各種重組蛋白的生產(chǎn)純化，涵蓋不同科研領(lǐng)域的熱門(mén)靶點(diǎn)，滿(mǎn)足不同客戶(hù)的實(shí)驗需求。歡迎咨詢(xún)！
