在IHC實(shí)驗中,即便是一些小的問(wèn)題,也可能會(huì )影響到實(shí)驗的結果,所以,在實(shí)驗過(guò)程中,我們需要注意各個(gè)細節問(wèn)題。其中,稀釋液的使用也是非常重要的一個(gè)環(huán)節。之前有很多人遇到過(guò)這樣的情況,明明實(shí)驗步驟沒(méi)問(wèn)題,但是結果卻達不到自己的要求,最后發(fā)現是抗體稀釋液選擇的問(wèn)題。有鑒于此,普健生物在這里和大家具體聊聊。
選擇合適的稀釋液有多重要?
選擇一款合適的稀釋液,其重要程度是不言而喻的,因為稀釋液的PH值和離子強度的差異,能夠有效促進(jìn)抗體與靶標之間的特異性作用。當然了,稀釋液也會(huì )影響到抗體與靶分子之間的非特異性,甚至可能會(huì )影響到抗體的穩定性。而合適的稀釋液能夠支持抗體表位之間的相互作用,支持染色強度。所以,當我們在實(shí)驗過(guò)程中發(fā)現實(shí)驗信號低的時(shí)候,可以?xún)?yōu)先排查一下抗體稀釋液的選擇是否正確。
如何確定抗體的稀釋液呢?
其實(shí)生物學(xué)發(fā)展到了今天,很多文獻中已經(jīng)給出了相應的稀釋液選擇方式,而且每個(gè)企業(yè)都會(huì )有自己的一套搭配方式,我們只需要根據這套方式來(lái)選擇對應的稀釋液即可;
選擇了錯誤的抗體稀釋液會(huì )造成什么問(wèn)題?
對于不同的抗體來(lái)說(shuō),情況也是各不相同的。比如某些抗體使用不同的稀釋液其敏感性相似,而有的抗體則會(huì )出現四十頁(yè)敏感性高于其他敏感性的問(wèn)題。這些情況都會(huì )造成我們實(shí)驗結果出現偏差。
所以說(shuō),在IHC實(shí)驗過(guò)程中,不僅稀釋液的選擇非常的重要,一些細節方面的操作也是非常重要的,只有按照合適的方式來(lái)操作,才能在更大程度上保證實(shí)驗的成功。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。