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抗體純化在我們生物實(shí)驗中是必不可少的一步，它不僅能提純蛋白來(lái)提升蛋白結合的效率，而且能夠減少其他物質(zhì)對實(shí)驗結果的影響?？梢哉f(shuō)，蛋白純化是后續實(shí)驗能否更加精確的保證。但是，在蛋白純化過(guò)程中，我們常常會(huì )遇到很多問(wèn)題，這些問(wèn)題可能會(huì )造成蛋白純化率不高，更有甚者會(huì )造成蛋白出現更多雜質(zhì)的情況。今天，普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)蛋白純化中一些可能會(huì )影響到純化效率的幾個(gè)內容。
說(shuō)到蛋白純化，其實(shí)原理很簡(jiǎn)單，它就是通過(guò)一些工藝分離出和產(chǎn)品相關(guān)的一些雜質(zhì)，以達到獲得高純度、低潛在危害物的蛋白產(chǎn)品(主要去除過(guò)程中細胞、細胞碎片、宿主蛋白、宿主細胞核以及培養液中的一些養料成分)。而在蛋白純化過(guò)程中，第一步就是離心和過(guò)濾。
在實(shí)驗室中，純化和離心只需要單次離心即可完成，而在大規模蛋白純化中，則需要連續分離的方式，通過(guò)深層過(guò)濾、切向流過(guò)濾和連續流離心等方式來(lái)進(jìn)行。
深層過(guò)濾相對簡(jiǎn)單且前期的投入少。因為深層過(guò)濾介質(zhì)的孔徑分步廣，內表面積大，能夠通過(guò)孔徑截留和吸附雙重作用達到過(guò)濾的效果。但是其本身不能達到無(wú)菌過(guò)濾，只能起到初步純化的效果;
切向流濾器的使用則相對廣泛一些，因為其流向可以減少細胞在膜表面的沉積，實(shí)現大體積細胞液不堵塞的效果。其主要使用中空纖維，表面積大，能夠在孔腔內形成高剪切力;
連續流離心則是采用碟片式離心機進(jìn)行連續離心，大規模純化中則采用分離模式。其原理相對簡(jiǎn)單，離心機腔體為錐形，收獲液靠近軸心，離心后通過(guò)軸心排出，細胞則在離心力的作用下聚集在錐形底部。但是設備的操作相對復雜，更加容易出現故障，需要一定的專(zhuān)業(yè)技術(shù)能力;
總的來(lái)說(shuō)，離心為純化的第一步，只有做好了這一步，才能為后續的純化過(guò)程打好基礎。而我們上面提到的幾種方法，需要結合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇，搭配好相應的處理方式，這樣才能更好地得到我們所需要的結果。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
