聯(lián)系我們
這里有一個(gè)技術(shù)難題等你解鎖
卵巢癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病隱匿，致死率占各類(lèi)婦科腫瘤的首位。研究卵巢癌發(fā)生、復發(fā)和耐藥機制等，有針對性地制定治療策略刻不容緩。如何高效地從卵巢癌中分離培養卵巢癌細胞，對卵巢癌的研究至關(guān)重要。
為此，我們做了什么技術(shù)突破
成功在體外培養了原位卵巢癌，算不算
并且使該卵巢癌在體外可增殖哦
后期還會(huì )用于藥物藥敏篩選呢
悄悄告訴你，我們培養細胞有一套
采用新型3D細胞培養技術(shù)
養好細胞不再難
有人會(huì )說(shuō)，不就養個(gè)細胞，有什么難的
真的挺難的~不信你看~
[實(shí)例展示]
獲得2例卵巢癌患者的捐贈組織，進(jìn)行了2D培養與3D培養。
經(jīng)培養發(fā)現：2例卵巢細胞在傳統的平面培養上，細胞形態(tài)并未發(fā)現明顯的差異，在一周內還具有卵巢癌荷包蛋特征樣細胞形態(tài)，同時(shí)也含有一些貼壁生長(cháng)的間質(zhì)細胞，隨著(zhù)培養時(shí)間的增長(cháng)，卵巢癌細胞逐漸退化或死亡，其生長(cháng)空間被間充質(zhì)細胞所占據（見(jiàn)圖1）。這是目前原位腫瘤細胞體外培養的一道瓶頸。
圖1. 2例捐獻者分離細胞在2D培養條件下的生長(cháng)情況
在三維培養條件下，可見(jiàn)細胞密度隨培養時(shí)間的增加在逐漸增多且生長(cháng)良好，隨著(zhù)培養時(shí)間的延長(cháng)并未出現平面培養上的纖維狀細胞逐漸增多的現象，可見(jiàn)三維培養更有利于腫瘤細胞的生長(cháng)（見(jiàn)圖2）。同時(shí)，我們還通過(guò)MTT法檢測了細胞在材料中的增殖情況（見(jiàn)圖3）發(fā)現：細胞的增殖活性與細胞狀態(tài)呈正相關(guān)，患者1較患者2組織分離獲得的細胞活性低，這可能是卵巢癌的種類(lèi)與分級有關(guān)。
圖2. 2例捐獻者分離細胞在3D培養條件下的生長(cháng)情況
圖3. 2例捐獻者分離細胞在3D培養條件下的增殖情況
從三維培養的增殖檢測數據也不難發(fā)現，在體外三維培養條件下癌細胞的增殖速度逐漸減緩，這也更契合生物體內腫瘤的發(fā)生發(fā)展規律，腫瘤細胞雖較正常細胞增殖迅速，但在體內腫瘤潛伏期及腫瘤灶轉移等均是一個(gè)隱秘而漫長(cháng)的過(guò)程。
針對實(shí)驗室條件培養的2例卵巢癌細胞的三維形態(tài)，我們對照卵巢癌組織的病理分型特征，對此2例卵巢癌腫瘤進(jìn)行了初步診斷，獲得以下結論：
1. 患者2的卵巢癌腫瘤分級高于患者1；
2. 從三維細胞培養形態(tài)上，患者1分離獲得的卵巢癌細胞呈荷包蛋樣且細胞大小不一，在分離處理過(guò)程中有大量黃色黏液流出，且在分離初期細胞多聚團，考慮為黏液性卵巢癌；
3. 從三維細胞培養形態(tài)上，患者2分離獲得的卵巢癌細胞細胞個(gè)大，呈顯著(zhù)的荷包蛋樣且增殖速度較快，腫瘤細胞惡性程度較高，可能為上皮性囊腔腫瘤，可能存在轉移灶。
實(shí)驗取得了令人振奮的結果：
經(jīng)與患者病理檢測報告對比，最終發(fā)現我們根據三維培養的細胞形態(tài)得到的初步判斷結果與最終病理檢測結果基本一致。
特別說(shuō)明：本實(shí)驗由華中科技大學(xué)同濟醫院·陳剛教授團隊，提供卵巢癌組織材料及技術(shù)指導。
到此我們不得不提
本項研究最關(guān)鍵的技術(shù)——3D細胞培養
成功解決細胞培養這一技術(shù)難題
3D細胞培養是一種模擬體內三維生長(cháng)環(huán)境的細胞培養方式。通過(guò)讓細胞聚集成3D球體或者將細胞在成分結構類(lèi)似于實(shí)體組織的三維結構載體上粘附、伸展和生長(cháng)，從時(shí)間和空間上共同調控細胞的增殖和分化，使組織結構和功能得以較大程度保留。
與2D培養相比，3D培養更真實(shí)地再現了細胞與細胞之間以及細胞與細胞間微環(huán)境的相互作用，更準確地模擬組織在正常生理狀態(tài)下情況及反應，突破了傳統細胞培養耗時(shí)繁瑣，細胞產(chǎn)量微小等局限性。
應用：隨著(zhù)3D細胞培養技術(shù)不斷完善，以此為基礎的新型高通量藥物檢測及篩查系統正在成為生物醫藥領(lǐng)域的技術(shù)新熱點(diǎn)，并逐漸在藥物研發(fā)、療效評估，毒性檢測及臨床檢測等方面發(fā)揮著(zhù)越來(lái)越廣泛的作用。
重磅出擊
(Atagenix—3D細胞培養)
我們的3D細胞培養技術(shù)秘籍
——新型的3D細胞培養材料AccuraMatrix
國際領(lǐng)先、自主知識產(chǎn)權的新型生物構架，用于體外細胞3D培養及類(lèi)組織器官（Organoid）的建立。
普健生物3D培養材料優(yōu)點(diǎn)
1高純度、低免疫原性；
2多層氣孔基質(zhì)：與生理細胞外基質(zhì)相似；
3細胞附著(zhù)的可質(zhì)子化表面：增強細胞附著(zhù)；
4可調節物理和化學(xué)性質(zhì)的基質(zhì)材料：滿(mǎn)足不同類(lèi)型細胞生長(cháng)的特定要求；
5使用廣泛，可應用于細胞生長(cháng)和分化、干細胞研究、代謝和毒理學(xué)研究、體內外血管生長(cháng)研究、體外腫瘤細胞生物學(xué)特性研究、腫瘤異種移植模型研究等領(lǐng)域。
