什么是內參抗體?如何挑選合適的內參抗體?

　　抗體因為隨著(zhù)使用需求的不同，也發(fā)展出了很多不同的類(lèi)型，比如內參抗體、標簽抗體。這些抗體針對不同的使用需求，有著(zhù)不同的特性和使用方法，所以，選擇合適的抗體，也是我們日常工作中非常重要的一環(huán)。那么，什么是內參抗體呢?它的作用又有哪些呢?且看普健生物和您一一講述。

　　什么是內參抗體?

　　所謂的內參抗體，我們可以從字面上來(lái)解釋?zhuān)褪莾炔繀⒄湛贵w，它和目的抗體沒(méi)有直接聯(lián)系，而是一種精準制備抗體的輔助抗體。

　　比如我們需要對不同條件或不同組織細胞中表達的目的蛋白的相對多少進(jìn)行比較，那么就需要有相同的定量，這樣才會(huì )具備比較的基礎。但是在實(shí)驗中，可能會(huì )因為蛋白濃度不太精準，或者在上樣蛋白的時(shí)候，因為操作而產(chǎn)生偏差，這個(gè)時(shí)候，就需要有一款內部參照抗體來(lái)進(jìn)行校正作用。這類(lèi)抗體需要在冉細胞或組織間具備恒定的表達特性，而且表達量要高。這類(lèi)抗體，我們稱(chēng)之為內參抗體。

　　如何挑選合適的內參抗體呢?

　　對于內參抗體的挑選需要注意到很多細節方面的問(wèn)題，通常我們可以結合如下四點(diǎn)進(jìn)行挑選：

　　1、根據樣本來(lái)源挑選。針對哺乳動(dòng)物的組織細胞樣本，我們可以從GAPDH、COX4等產(chǎn)品中進(jìn)行挑選，其他來(lái)源的樣本，則需要結合相關(guān)文獻挑選;

　　2、根據分子大小挑選。針對分子量的不同，我們需要結合分子大小來(lái)挑選合適的內參抗體。在WB實(shí)驗中，我們一般選擇大小差異5kDa以上，也就是說(shuō)不要選擇分子量太過(guò)接近的，否則不利于后期的條帶分析;

　　3、結合表達位置挑選。一般的蛋白檢測可以考慮選擇那些常用的內參抗體(比如：β-actin、GAPDH抗體等)。當然了，針對哪些核蛋白很定的，我們可以考慮結合文獻來(lái)進(jìn)行選擇;

　　4、根據表達恒定性挑選。挑選的抗體需要看其是否會(huì )受到條件變化的影響，比如溫度、PH值、濃度等方面的影響，這個(gè)很重要。比如，GAPDH常常用來(lái)作為內參抗體，到那時(shí)在進(jìn)行代謝研究的時(shí)候，就不適用;

　　總的來(lái)說(shuō)，內參抗體的選擇并沒(méi)有想象中的復雜，需要結合使用需求，選擇合適的。當實(shí)在不知道如何選擇的時(shí)候，我們可以結合相應的文獻來(lái)進(jìn)行挑選，一般來(lái)說(shuō)，都能夠選擇到合適的抗體產(chǎn)品。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的抗體制備和定制服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。