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抗體親和力成熟的概念在我們進(jìn)行相關(guān)抗體制備的過(guò)程中常常會(huì )用到，這個(gè)技術(shù)能在一定程度上解決抗體質(zhì)量方面的問(wèn)題，也能提升表達的效率。而想要實(shí)現抗體親和力成熟，必須對天然抗體有充分的了解，同時(shí)知道其體內成熟的原理，然后通過(guò)模擬天外可能出現和存在的一些變化，從而通過(guò)相關(guān)條件來(lái)促進(jìn)抗體的體外成熟。
對于天然抗體來(lái)說(shuō)，親和力成熟一般分為體細胞高頻突變和克隆選擇兩個(gè)過(guò)程，想要抗體出現親和力成熟，抗原的刺激起著(zhù)至關(guān)重要的作用。所以，我們在進(jìn)行體外抗體親和力成熟時(shí)，也常常會(huì )利用到相關(guān)策略。下面，普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)抗體體外親和力成熟的幾個(gè)策略。
策略一：隨機突變
1、錯配PCR。通過(guò)改變PCR的反應條件，從而提升核酸發(fā)生錯配的幾率，最終將隨機突變引入到基因序列中;
2、DNA改組。通過(guò)對抗體基因進(jìn)行脫氧核酸酶I切片，隨后在進(jìn)行PCR擴增，從而完成抗體基因的突變;
3、鏈改組。也叫鏈天技術(shù)，其中一條輕重鏈不變，但是對另外一條輕重鏈進(jìn)行重組和配對，從而提升抗體親和力(通常會(huì )將噬菌體展示技術(shù)與此技術(shù)結合使用);
策略二：定向引入
也叫CDR重組。在抗體親和力成熟的過(guò)程中，細胞內的高頻突變區并非均勻分布，而是主要集中在直接接觸的部位。因此，這樣既能獲得足夠多的突變多樣性，又不會(huì )破壞蛋白質(zhì)的結構。所以，我們可以通過(guò)在CDR區引入多個(gè)抗體，再通過(guò)抗體庫進(jìn)行CDR區的多次重組，這樣就能達到親和力成熟的目的;
所謂的抗體親和力成熟的過(guò)程，其實(shí)就是一個(gè)體外分子進(jìn)化、多樣化和擴增的過(guò)程，這個(gè)過(guò)程能夠得到高親和力的抗體，使得低劑量藥劑要過(guò)增強的作用?？贵w親和力成熟，能增加治療效果，減少各種毒副作用，在抗體藥物研發(fā)過(guò)程中有著(zhù)至關(guān)重要的作用。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供SPR抗體檢測服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
