傳統的抗體制備方式就是通過(guò)抗原來(lái)刺激動(dòng)物,讓其產(chǎn)生免疫應答反應。然后再通過(guò)提取血清或提取脾臟細胞與骨髓瘤細胞結合來(lái)產(chǎn)生抗體??偟膩?lái)說(shuō),抗體制備過(guò)程中的任何一個(gè)過(guò)程都可能會(huì )影響到抗體質(zhì)量的好壞,所以,想要獲得優(yōu)質(zhì)蛋白,就必須做好任何一個(gè)細節問(wèn)題。作為抗體制備的第一步,動(dòng)怒免疫是直接制約著(zhù)抗體質(zhì)量好壞的基礎。那么,如何做好動(dòng)物免疫呢?
所謂的動(dòng)物免疫,其實(shí)就是生物體自身體液針對抗原所產(chǎn)生的一種免疫應答機制,通過(guò)抗原對機體的持續性刺激,讓其先后啟動(dòng)初次免疫反應和次級免疫反應,然后通過(guò)對血清中的蛋白含量來(lái)進(jìn)行判斷免疫效果。一般來(lái)說(shuō),初次免疫會(huì )有一定的滯后期,而此次免疫則不會(huì ),而且啟動(dòng)更快,強度更大,同時(shí)分泌的抗體經(jīng)過(guò)親和力成熟和亞型轉換,質(zhì)量更佳。
那么,還有什么其他需要注意的嗎?
1、動(dòng)物選擇。盡量選擇健康的雄性動(dòng)物,而且在免疫過(guò)程中也要盡量保證無(wú)免疫病;
2、種屬差異選擇??乖c免疫動(dòng)物種屬差異盡量越遠越好,如果太近,抗原可能無(wú)法識別;
3、免疫劑量調整。針對選用動(dòng)物不同,需要對劑量及間隔時(shí)間鍵調整,大動(dòng)物約0.5~1mg/只,小動(dòng)物約0.1~0.6mg/只,當然了,這個(gè)量也可以根據實(shí)際情況進(jìn)行調整;
4、注射途徑選擇。注射的途徑有很多種,足掌、肘窩、頸部等,最廣泛使用的是皮下注射方式,當然了,針對不同的情況,也可以進(jìn)行適當的調整;
5、免疫時(shí)間間隔。免疫時(shí)間的間隔也是一個(gè)重要因素,特別是首次和第二次之間。首次免疫后需要間隔10-20天,之后的間隔在7-10天,這個(gè)時(shí)間不能太長(cháng),可能會(huì )造成刺激變弱導致抗體效價(jià)不高。一般來(lái)說(shuō),免疫5輪以上最好;
雖然說(shuō)動(dòng)物免疫看起來(lái)好像沒(méi)人特別拿過(guò)來(lái)說(shuō),但是它卻直接制約著(zhù)抗體制備成功與否的關(guān)鍵,只有做好了這方面的工作,才能更好地進(jìn)行后期的操作。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
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