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劃重點(diǎn)：
•雜交瘤技術(shù)是獲得單克隆抗體最常用的技術(shù)。
•雜交瘤技術(shù)變體包括B細胞和立體特異性靶向協(xié)議。
•噬菌體展示技術(shù)和單B細胞技術(shù)是雜交瘤技術(shù)的替代方案。
單克隆抗體(mab)是一種通用的高度特異性結合蛋白，長(cháng)期以來(lái)被認為是對抗疾病的“魔彈”，也是診斷和研究等其他生物學(xué)用途的重要工具。這些應用只有在允許分離單個(gè)抗體的方法出現后才有可能。雜交瘤技術(shù)是這方面的先驅。事實(shí)上，這項技術(shù)徹底改變了治療和研究領(lǐng)域，1984年諾貝爾生理學(xué)或醫學(xué)獎進(jìn)一步認可了這一點(diǎn)。那么雜交瘤技術(shù)隨著(zhù)時(shí)間的推移發(fā)展，與其他方法相比，雜交瘤技術(shù)又有哪些優(yōu)勢和局限性呢？
雜交瘤技術(shù)由Georges Köhler和Cesar Milstein于1975年基于用所需抗原免疫動(dòng)物，然后將特異性B淋巴細胞與“不朽”骨髓瘤細胞融合，然后被克隆以獲得穩定的單克隆細胞系，在選擇感興趣的抗體分泌克隆后，將細胞轉移到大規模培養裝置中，以產(chǎn)生所需數量的抗體。
自引入雜交瘤技術(shù)以來(lái)，單克隆抗體對醫學(xué)產(chǎn)生了深遠的影響，提供了幾乎更多的診斷和研究試劑來(lái)源。鑒于單克隆抗體的通用性和實(shí)用性，雜交瘤技術(shù)帶來(lái)了許多發(fā)現，允許產(chǎn)生針對抗原的抗體，甚至針對同一抗原的不同抗體。但雜交瘤技術(shù)也有其局限性，因此，科學(xué)家們在雜交瘤技術(shù)的基礎上，還發(fā)現了噬菌體展示技術(shù)和單B細胞技術(shù)。
雜交瘤技術(shù)
優(yōu)點(diǎn)：
保留了可變區和恒定區基因組合的原生配對。
抗體嵌合和人源化方法以及轉基因動(dòng)物可用于獲得用于人類(lèi)治療的單克隆抗體。
抗體在體內親和成熟。
缺點(diǎn)：
需要已知和可用的抗原靶點(diǎn)。
細胞融合和雜交瘤分離效率低。
細胞系的產(chǎn)生和特異性雜交瘤的選擇需要相對較長(cháng)的時(shí)間。
雜交瘤細胞系可能在遺傳上不穩定。
細胞培養物污染的持續風(fēng)險。
噬菌體展示技術(shù)
優(yōu)點(diǎn)：
不需要動(dòng)物宿主。
大量克隆的篩選增加了產(chǎn)生良好單克隆抗體的機會(huì )。
分離抗毒性和非免疫原性抗原的單克隆抗體的潛力。
重新設計天然cdr以產(chǎn)生特異性和親和力更高的單克隆抗體的可能性。
龐大的展示文庫數據來(lái)源。
缺點(diǎn)：
噬菌體文庫的多樣性取決于細菌轉化效率。
抗體格式僅限于scFv和Fab。
建立噬菌體展示文庫成本高昂。
單個(gè)B細胞技術(shù)
優(yōu)點(diǎn)：
與雜交瘤技術(shù)相比，獲得特異性單克隆抗體的效率更高。
從接種疫苗或自然免疫的人類(lèi)受試者中分離單克隆抗體的可能性。
原生單克隆抗體的分離，并保留天然同源VH和VL配對。
不需要B細胞培養過(guò)程。
具有分離抗體外難以模擬的構象決定簇的功能性單克隆抗體的潛力。
可以區分處于不同發(fā)育和分化階段的B細胞。
在實(shí)驗研究中，B細胞可以從多個(gè)樣本中分離出來(lái)，而不需要對動(dòng)物實(shí)施安樂(lè )死。
抗體在體內經(jīng)歷親和成熟。
缺點(diǎn)：
單細胞分選設備價(jià)格昂貴。
RT-PCR程序可能具有挑戰性。
針對B細胞標記物的抗體并非適用于所有物種。
