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重組抗體表達相信大家已經(jīng)耳熟能詳了，通過(guò)重組抗體表達技術(shù)，能夠讓我們獲得很多傳統抗體無(wú)法實(shí)現的功能，使得疾病醫治變得更加的簡(jiǎn)單。但是，對于很多人來(lái)說(shuō)，重組抗體表達的成功率不高，但是又和設計以及操作沒(méi)有太大關(guān)系。這是為什么呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊重組抗體表達中的一些常見(jiàn)問(wèn)題。
1、重組抗體穩定性不高，如何提升?
一般來(lái)說(shuō)，很多重組抗體的穩定性都不強，我們可以通過(guò)優(yōu)化洗脫條件，將高PH值逐漸降低，選擇最適合的表達環(huán)境。同時(shí)，純化的樣本需要及時(shí)進(jìn)行中和，如果有需求，可以選擇邊純化邊中和。對于純化后的樣品可以選擇在合適的低溫環(huán)境下保存，同時(shí)添加蛋白保護劑以降低蛋白的溶解速率;
2、哺乳動(dòng)物表達系統，是否選擇CHO?
CHO細胞的使用范圍非常的廣泛，但是也并不是所有的環(huán)境下都適合。我們需要結合表達需求來(lái)進(jìn)行綜合選擇，這樣才能在更大程度上保證重組蛋白的表達效率;
3、重組抗體的載體要如何選擇?
重組抗體表達所選載體和細胞最好配對使用，如果選擇的非配套的，很容易造成蛋白表達量低的情況;
4、如何提升重組抗體的表達量?
其實(shí)就是表達系統和方法的選擇，盡量選擇表達量高的系統，表達細胞一定要選擇狀態(tài)好活性強的細胞，如果時(shí)間允許，還需要對表達進(jìn)行優(yōu)化，延長(cháng)表達時(shí)間，以便于獲得質(zhì)量更好的抗體;
5、有關(guān)抗體活性方面的判斷。
一般來(lái)說(shuō)，真核表達系統所表達的抗體活性要強過(guò)原核表達，不過(guò)不同的抗體其穩定性不同，具體需要結合實(shí)際需求來(lái)選擇;
6、重組抗體的表達量可否通過(guò)高通量篩選來(lái)實(shí)現?
答案是肯定的，采用高通量抗體表達系統和篩選，能夠有效提升抗體的表達量，當然了，其中的費用投入相對來(lái)說(shuō)也要高一些，所以，我們需要結合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇;
總的來(lái)說(shuō)，重組抗體表達過(guò)程中需要注意的事項有很多，一些細節方面的操作也能在極大程度上制約著(zhù)抗體的表達量。所以，在日常使用中，我們需要嚴格按照是按步驟來(lái)進(jìn)行相關(guān)操作，這樣才能在更大程度上保證重組抗體的表達量。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組抗體表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
