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    噬菌體抗體文庫和噬菌體抗體庫的多樣性

    發(fā)表時(shí)間:2023-08-30 訪(fǎng)問(wèn)次數:476

    癌癥等疾病的流行以及對免疫療法需求的增加正在推動(dòng)針對致病細胞和生物體的技術(shù)的發(fā)展。這導致了所謂的抗體庫的發(fā)展。從歷史上看,開(kāi)發(fā)預防疾病的疫苗和治療方法的主要方法是從感染后幸存下來(lái)的人身上收集抗體。免疫細胞需要分離,并且必須篩選大量抗體,以找到與特定病原體結合最緊密的抗體。然而,這可能很耗時(shí),有時(shí)時(shí)間至關(guān)重要——COVID-19大流行一直提醒著(zhù)我們。

     

    顧名思義,抗體庫是現有抗體的文庫,可以搜索這些庫以提供可能對病原體有效的抗體。通過(guò)采用這種方法,可以大大加快藥物發(fā)現過(guò)程。通過(guò)從幾百人那里收集樣本,抗體庫中可以存儲許多倍的人類(lèi)抗體。

     

    抗體庫是衍生抗體的重要資源,可用于廣泛的應用,從結構和功能研究到細胞內蛋白質(zhì)干擾研究,再到開(kāi)發(fā)新的診斷和治療方法。無(wú)論目標是什么,抗體庫的關(guān)鍵參數是其復雜性(也稱(chēng)為多樣性),即集合中不同元素的數量,這直接反映了在庫中發(fā)現針對給定抗原的抗體的概率,具有足夠高的親和力。由于抗體庫序列的高度相似性和長(cháng)度,長(cháng)期以來(lái),抗體庫復雜性和質(zhì)量的定量評估一直沒(méi)有得到充分解決。復雜性通常由轉化效率推斷,并通過(guò)指紋識別和/或對幾百個(gè)隨機文庫元素的測序進(jìn)行測試。

     

    抗體庫中常用的一種技術(shù)是噬菌體展示,其中表面帶有抗體的基因操縱噬菌體與固定化抗原結合。洗滌后,任何剩余的噬菌體都會(huì )顯示感興趣的抗體。然后可以將這些插入大腸桿菌中以擴增抗體以進(jìn)行進(jìn)一步研究。

     

    目前世界上有很多的全人源抗體庫,可以分為天然抗體庫,半合成抗體庫和合成抗體庫,不過(guò)大部分抗體文庫都存在著(zhù)供體少、庫容低、多樣性差、親和力弱、錯配率高等問(wèn)題,普健生物構建了千億級別、高親和力全人源重組天然抗體文庫,經(jīng)過(guò)驗證,任意靶點(diǎn)從文庫中直接篩選,一般可以獲得十幾個(gè)到上百個(gè)高親和力的克隆,其親和力、特異性都達到行業(yè)領(lǐng)先水平。

    普健生物擁有領(lǐng)先的噬菌體技術(shù)平臺,利用噬菌體展示技術(shù),普健生物提供構建噬菌體展示抗體文庫、噬菌體展示多肽文庫、抗原表位篩選、抗體親和力成熟等技術(shù)服務(wù)。同時(shí)普健生物具有鼠源天然抗體文庫、兔源天然抗體文庫、納米抗體天然抗體文庫、重組全人源噬菌體抗體文庫等。

     

    普健生物千億級全人重組抗體庫優(yōu)勢:

    1.序列正確性高,現階段庫容已達近千億級別(1011pfu)。

    2.兩步法建庫,先連入輕鏈再連入重鏈,將來(lái)自全世界不同地區人種來(lái)源的輕鏈和重鏈隨機組合,保證了庫的高

    質(zhì)量和多樣性。

    3.分為κ和λ兩種輕鏈亞型的單鏈抗體庫,與大多數商業(yè)化混合庫不同,即可用于篩選κ型抗體,也可用于篩

    λ型的高親和力抗體。

    4.帶有His標簽,可直接用phagemid表達抗體,His標簽純化。

    QC檢測:

    1.總插入率及正確率

    片段插入率100%,抗體序列正確率>90%。

    2.抗體序列多樣性分析

    種系基因(Germline)分析:種系基因主要指單倍體生殖細胞和干細胞中所含有,未發(fā)生重排的全部基因??贵w

    庫一般只分析抗體序列里面V基因的種系分布。

    互補決定區(CDR)分析:抗體分子可分為恒定區和可變區兩部分。在可變區內有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈,

    這個(gè)區域稱(chēng)高變區(HVR)。在L鏈、H鏈的V區中有三個(gè)高變區,該部位因在空間結構上可與抗原決定簇形成精密的互補,

    又稱(chēng)互補性決定區。

    我們的優(yōu)勢

    豐富的噬菌體抗體技術(shù)經(jīng)驗,五年以上噬菌體抗體開(kāi)發(fā),交付上百個(gè)噬菌體展示抗體開(kāi)發(fā)項目

    具有全人源重組抗體庫,庫容高達千億級別(1011pfu),兩步建庫法,保證了文庫的多樣性,抗體庫片段插入;正確率高;可以?xún)芍苣玫饺嗽粗亟M抗體

    可以構建多物種(人源、小鼠、兔子、羊駝等)抗體文庫

    可以構建多種類(lèi)型(scfv、Fab、VHH等)的抗體文庫

     

    研究人員越來(lái)越多地使用抗體庫來(lái)尋找新的藥物靶點(diǎn)、抗體、疾病的生物標志物等。隨著(zhù)更多抗體的發(fā)現和更多的組合被納入其中,新藥和疫苗的開(kāi)發(fā)將繼續顯示出改進(jìn)。

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