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    如何做好細胞培養工作?普健生物告訴您

    發(fā)表時(shí)間:2023-10-16 訪(fǎng)問(wèn)次數:596

      所謂的細胞培養,指的是通過(guò)體外培養技術(shù)實(shí)現細胞分裂等生理狀態(tài)的過(guò)程。即在無(wú)菌條件下,從機體中提取細胞,并讓其在模擬體內環(huán)境下繼續生存、生長(cháng)且繁殖的過(guò)程。通過(guò)細胞培養,我們可以獲得大量、性質(zhì)相同的細胞從而進(jìn)行抗體蛋白等產(chǎn)品的制備。那么,細胞培養的具體步驟是怎樣的呢?今天,普健生物就在這里和大家具體聊聊。

      1、細胞傳代

      當細胞匯合度達到80-90%時(shí),吸出培養液,再加入PBS潤洗細胞,吸出PBS后加入胰酶放入培養箱。具體的消化時(shí)間因細胞而異,而后通過(guò)吹打細胞使之脫落,并盡量讓其保持單科細胞的懸浮液。之后,再通過(guò)離心機離心,吸出上清液并丟棄。最后再加入到培養基,補足培養液后再繼續培養即可;

      2、細胞換液

      吸出原培養液,并加入PBS混合后晃動(dòng)培養瓶,潤洗細胞后吸出PBS。而后加入含新鮮血清的培養基,最后繼續培養即可;

      3、細胞凍存

      按照7:2:1的比例加入培養基、血清、DMSO配置好凍存液,而后將其至于室溫中備用。將細胞制備成懸液,通過(guò)離心機去除上清液加入凍存液后搖勻。將所得混合液均勻分裝,密封后選擇合適溫度凍存;

      4、細胞復蘇

      去除凍存的細胞,至于37度熱水中解凍。在解凍過(guò)程中,需要對其進(jìn)行觀(guān)察,當只有一小塊冰存在時(shí),將其從水中取出。將細胞懸浮液吸入離心管中,搖勻后離心5分鐘,并去除上清液。而后在其中加入培養液并培養,24小時(shí)后換一次培養液即可;

      總的來(lái)說(shuō),細胞保存的過(guò)程并沒(méi)有多么復雜,但是在凍存和解凍的過(guò)程中有很多細節問(wèn)題需要引起注意。而且關(guān)于細胞凍存的溫度需要特別注意,否則很容易造成細胞的損壞。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供細胞培養凍存等服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。

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