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非洲豬瘟(Africanswinefever，ASF)是由非洲豬瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)感染豬而引起的一種急性、烈性傳染病，死亡率可達100%，已被世界動(dòng)物衛生組織(WorldOrganizationforAnimalHealth,WOAH)列為法定報告動(dòng)物疫病。目前尚無(wú)有效藥物和疫苗用于治療和預防ASF，主要通過(guò)臨床診斷和撲殺感染動(dòng)物來(lái)控制疫情傳播。建立快速、精準和高效的診斷方法對于疫病防控至關(guān)重要。當前，國內外ASF相關(guān)診斷技術(shù)主要包括傳統病原學(xué)診斷技術(shù)、新型病原學(xué)診斷技術(shù)以及血清學(xué)診斷技術(shù)等。
傳統病原學(xué)診斷技術(shù)
利用病原學(xué)診斷技術(shù)能夠在ASF疫情早期檢測出動(dòng)物體內是否攜帶病毒。傳統病原學(xué)診斷技術(shù)主要包括病毒分離實(shí)驗和紅細胞吸附實(shí)驗(haemadsorption，HAD)。與血清學(xué)檢測方法相比，病原學(xué)檢測結果可以直接判斷是否感染病毒。此外，病毒核酸檢測包括聚合酶鏈式反應(polymerasechainreaction,PCR)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)等方法，具有靈敏度高的特點(diǎn)。傳統病原學(xué)診斷技術(shù)在ASF的早期診斷和流行病學(xué)調查中發(fā)揮了重要作用，可降低病毒傳播風(fēng)險，從而預防ASF的大規模傳播流行，減少ASF暴發(fā)導致的經(jīng)濟損失。
新型病原學(xué)診斷技術(shù)
隨著(zhù)對ASFV的深入研究和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，一系列新型核酸診斷技術(shù)逐漸被開(kāi)發(fā)，如微滴數字PCR(dropletdigitalpolymerasechainreaction,ddPCR)檢測技術(shù)、LAMP技術(shù)、重組酶聚合酶擴增(recombinasepolymeraseamplification,RPA)技術(shù)和以CRISPR/Cas(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associatedproteinssystem)為基礎的檢測技術(shù)等，這些新型診斷技術(shù)為ASF的精確診斷和有效防控提供了更加全面的支持。
血清學(xué)診斷技術(shù)
血清學(xué)診斷是基于抗原抗體反應來(lái)診斷和監測是否存在病毒感染。WOAH推薦的ASF血清學(xué)檢測方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)、間接免疫熒光實(shí)驗(indirectimmunofluorescenceassay,IFA)、間接免疫過(guò)氧化物酶實(shí)驗(indirectimmunoperoxidasetest,IPT)及免疫層析實(shí)驗等。血清學(xué)檢測可以用于豬群疫病狀態(tài)的定期監測，能夠發(fā)現病毒的慢性感染，有利于控制潛在疫情的發(fā)生和擴散。
目前，ASF檢測技術(shù)主要包括病原學(xué)與血清學(xué)檢測方法，每種方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)。在ASF病原學(xué)檢測方面，PCR和qPCR檢測靈敏性高，但其檢測結果易出現假陽(yáng)性；LAMP和RPA等無(wú)需專(zhuān)業(yè)設備，但對人員和工作環(huán)境要求高，易造成氣溶膠污染；ddPCR具有高敏性和特異性，但昂貴的實(shí)驗設備限制了其臨床應用;利用CRISPR/Cas系統進(jìn)行檢測的技術(shù)仍然處于初步研發(fā)階段，尚未有商品化的產(chǎn)品。近期流行病學(xué)調查發(fā)現了較低毒力的ASFV毒株，能夠引起慢性或持續性感染，臨床檢測可能會(huì )出現病毒核酸檢測陰性但抗體檢測陽(yáng)性的情況，給ASF病原學(xué)診斷帶來(lái)了很大的挑戰。
參考文獻
ZHANG Yuan-yuan, JIN Jia-xin, ZHAO Xu-yang, ZHANG Shuai, LIU Yue-yue, LI Xiang-lin, SUN Ai-jun, LIN Shu-qian, ZHUANG Guo-qing. Research Progress of Novel Diagnostic Methods of African Swine Fever. Journal of Chinese Biotechnology, 2023, 43(10): 62-71 doi:10.13523/j.cb.2305012
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