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人類(lèi)巨細胞病毒（humancytomegalovirus，HCMV）是最常見(jiàn)的先天性感染病原體之一，屬于皰疹病毒科中結構最復雜的一種病毒，在大部分人群中存在隱性感染，當機體免疫力下降時(shí)將出現活動(dòng)性HCMV感染，甚至危及患者生命。
HCMV(人類(lèi)巨細胞病毒)屬于疹病毒科乙組疤疹病毒亞科，是最大的動(dòng)物病毒之一，其感染非常普遍。HCMV感染可以導致間質(zhì)性肺炎、免疫力受抑及器官植入失敗，其感染形式多呈隱性感染或潛伏感染。對于大多數人來(lái)說(shuō)，HCMV感染不是一個(gè)大問(wèn)題，但對于高?；颊邉t是危及生命的。當機體免疫力降低時(shí)，潛伏狀態(tài)HCMV再活化而引起發(fā)病，如器官移植后接受免疫抑制劑治療、惡性腫瘤化療、HIV感染導致免疫缺陷或免疫抑制狀態(tài)。
HCMV結構蛋白包括衣殼蛋白被膜蛋白以及包膜蛋白，研究最廣泛的是后兩者，其中被膜磷蛋白和包膜糖蛋白抗原性強，具有廣泛的臨床應用前景。
有5種被膜磷蛋白研究比較清楚PP150、PP65、PP71、PP28和PP67。PP150的DNA序列和氨基酸序列與其他疹病毒無(wú)同源性，其抗原性在HCMV結構蛋白中最強，由于HCMV中還存在150kDa的衣殼蛋白，二者需雙向SDS-PAGE才易分開(kāi)并且需要免疫學(xué)鑒定因而限制了PP150的應用；PP65是被膜蛋白中最主要的一種，分子量為65kDa，它占被膜蛋白致密顆粒的95%，占整個(gè)病毒蛋白的15%在不同的HCMV毒株中，PP65具有高度保守性，整個(gè)感染周期中，PP65在感染細胞中持續表達，它在病毒感染及誘導機體免疫反應中起重要作用，它不僅可誘導高水平的特異性循環(huán)抗體，而且能誘導特異性的細胞免疫反應，目前其單克隆抗體在臨床上用于PP65血癥的診斷；PP28與其他疹病毒具有部分同源性，已有PP28DNA在大腸桿菌中表達獲得融合蛋白的報道，該融合蛋白可作為抗原檢測患者血清中相應的抗體；PP67的單克隆抗體無(wú)中和活性。
包膜糖蛋白是病毒毒粒表面的抗原決定簇，是有包膜病毒表面脂質(zhì)雙層膜的重要成分，它們與病毒識別宿主細胞膜受體、吸附和穿入細胞病毒的致病作用以及誘導宿主的免疫反應密切相關(guān)。HCMV包膜上至少有8種以上可以用電泳技術(shù)區分的糖蛋白復合物，其中研究最廣泛的是gB。gB是誘導產(chǎn)生抗HCMV中和抗體的主要抗原，目前最受關(guān)注的是其中AD-1和AD-2兩個(gè)抗原決定簇。gB上的第552~635個(gè)氨基酸之間的區域即AD-1，被證實(shí)是HCMV感染后引發(fā)體液免疫的主要抗原決定簇。AD-1是一個(gè)復雜的結構域，它包含一系列連續的長(cháng)度大于70bp的抗體結合位點(diǎn)。中和抗體與非中和抗體可以競爭性地與AD-1結合，有學(xué)者用含AD-1所有結構域的蛋白重組體來(lái)檢測與AD-1相結合的單克隆抗體的特異性及純化多克隆抗體的親和力，結果顯示所有單克隆抗體都擁有結合到重組蛋白的特有模式，說(shuō)明在AD-1含有與抗體結合的獨特位點(diǎn)，單克隆抗體與AD1的結合模式并不能預測單克隆抗體的中和活性。
抗AD-1的單克隆抗體阻止細胞與病毒融合的能力可達到20%~60%；AD-2的免疫原性很弱但被免疫系統識別后可以加強免疫保護作用。AD-2的單克隆抗體能有效阻止細胞與病毒的融合遠遠強于抗AD-1的單克隆抗體，但兩種單克隆抗體對于硫酸乙酷肝素介導的病毒吸附都沒(méi)有阻止作用。抗AD-2的單克隆抗體發(fā)揮中和病毒感染作用的機制可能是阻止了在病毒與細胞接觸初期受體與配體的結合過(guò)程，還有研究將抗AD-2的單克隆抗體的單鏈可變區制備成單體形式和二聚體形式，研究它們的中和作用及與AD-2作用的動(dòng)力學(xué)發(fā)現單體形式無(wú)中和作用，而二聚體形式盡管會(huì )與相結合的gB發(fā)生緩慢的解離，但卻有中和活性。
鼠源性抗體在臨床應用中可能會(huì )出現免疫原性，導致患者體內出現抗抗體，還有可能出現過(guò)敏反應，因此限制了其應用。有研究人員用感染過(guò)HCMV的健康人體的淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，融合細胞產(chǎn)生人源性抗體。普健生物作為一站式蛋白抗體開(kāi)發(fā)專(zhuān)家，在蛋白抗體領(lǐng)域擁有超過(guò)15年的技術(shù)經(jīng)驗積累，基于普健專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團隊、五大蛋白表達系統和三大核心技術(shù)路線(xiàn)，不僅可實(shí)現從抗原制備，到抗體生產(chǎn)，標記，檢測，測序一站式服務(wù)，還能幫助客戶(hù)輕松實(shí)現抗體人源化。
抗體人源化是指通過(guò)DNA重組技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，將鼠源單克隆抗體的大部分氨基酸人源化，以降低其異源性，保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性，這種通過(guò)基因重組所表達的抗體既有鼠源成分，又有人源成分，所以稱(chēng)為人源化抗體。
服務(wù)優(yōu)勢
- 普健生物擁有經(jīng)驗豐富的抗體人源化團隊，團隊的技術(shù)專(zhuān)家曾經(jīng)成功研制上市的治療性抗體藥物
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案例展示
國內許多學(xué)者也進(jìn)行了HCMV單克隆抗體的篩選，但大多數目的是用于抗原血癥的早期準確檢測。兩個(gè)或多個(gè)特異性強的重組抗原聯(lián)合使用制備特異性診斷性抗體，將是進(jìn)一步的研究方向。理論上講在感染初期使用McAbs可中和病毒顆?；罨苁共《靖腥炯毎芙獾难a體，從而防治HCMV感染但隨著(zhù)感染的發(fā)展，HCMV已整合到宿主細胞的細胞核中，并大量復制而誘發(fā)各種臨床綜合征，因此早期診斷、早期用藥就至關(guān)重要。
參考文獻
Han Dong-mei, Yin Wen, Chen Xie-qun. The evolution about the treatment of HCMV-infection by McAb [J]. Foreign Med Sci: Epidemiol Loimol,2004,31(03): 158-160.
