如何使用單B細胞技術(shù)制備兔單克隆抗體?

　　單克隆抗體制備是一項精細且復雜的工作，需要通過(guò)一系列的手段才能實(shí)現抗體的制備。而且隨著(zhù)技術(shù)的不斷發(fā)展，單克隆抗體從雜交瘤技術(shù)發(fā)展到現階段使用最為廣泛的單B細胞技術(shù)。

　　單B細胞技術(shù)其實(shí)就是通過(guò)分離單個(gè)B細胞，通過(guò)對其進(jìn)行克隆培養，結合多種PCR技術(shù)形成的一種體外篩選及表達體系。使用單B細胞技術(shù)制備的單克隆抗體具有高通量、高效率、低細胞數等優(yōu)點(diǎn)，是現如今最近、最高效的抗體篩選方法之一。

　　單B細胞技術(shù)制備流程：

　　1、鑒定和分離單個(gè)B細胞

　　單B細胞分離通常有兩種：隨機分離和抗原特異性分離。通過(guò)多次免疫兔子，檢驗血清中抗體含量及質(zhì)量，而后從中分離出B細胞;

　　2、擴增和克隆抗體基因

　　進(jìn)行細胞分選時(shí)，需要將B細胞注入到合適的培養液中，然后對其進(jìn)行RNA提取并進(jìn)行逆轉錄;

　　3、重組抗體表達

　　對所得DNA進(jìn)行目的基因表達，獲得相應的目標抗體;

　　4、抗體鑒定

　　將所得抗體進(jìn)行純化(可采用親和層析法或離子交換層析法進(jìn)行純化)，而后對抗體的特異性和生物活性進(jìn)行鑒定;

　　5、大規模生產(chǎn)

　　測定所得目的抗體特異性和生物活性達到我們要求后，開(kāi)始進(jìn)行大規模生產(chǎn);

　　單B細胞技術(shù)制備的單克隆抗體的優(yōu)勢：

　　1、高特異性。和其他動(dòng)物相比，兔免疫系統更加優(yōu)秀，所得抗體特異性更強;

　　2、高穩定性。兔單克隆抗體穩定性更高;

　　3、高親和力。兔B細胞的親和力是其他動(dòng)物的10-100倍;

　　當然了，單B細胞兔單克隆抗體制備技術(shù)雖然具備著(zhù)其他抗體表達系統所不具備的優(yōu)勢，但是，它需要的技術(shù)水平更高，相關(guān)制備成本也更高一些?？偟膩?lái)說(shuō)，只有具備相應技術(shù)實(shí)力的公司才能采用單B細胞技術(shù)制備抗體。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供兔單克隆抗體制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。