無(wú)論是單克隆抗體制備還是多克隆抗體制備,抗原的設計都是最為重要的一個(gè)過(guò)程,只有設計出合理的抗原,才能更好地刺激機體產(chǎn)生抗體。那么,抗原制備需要具備哪些條件?具體制備方法有哪些?以及制備過(guò)程中的注意事項有哪些?下面,普健生物和大家具體聊聊。
一個(gè)良好的抗原制備條件有哪些?
1、分子足夠大。對于多肽或蛋白類(lèi)抗原來(lái)說(shuō),其抗原決定簇直接關(guān)注到其抗體的產(chǎn)生。但是,對于抗原決定簇來(lái)說(shuō),其通常由6-8個(gè)氨基酸殘基組成,所以,只有分子量足夠大的抗體才能承載得上;
2、外源性強。所選抗體盡量和免疫機體異源性高,這樣才能更好的刺激機體產(chǎn)生抗體;
3、結構更復雜。一般來(lái)說(shuō),簡(jiǎn)單的物質(zhì)不具備免疫原性,只有結構足夠復雜,才能在更大程度上刺激免疫反應的發(fā)生;
4、可降解性好。作為抗原,必須是可降解的,否則,很容易對機體造成不可挽回的影響;
常用的抗原制備方法有哪些?
1、高純度的天然蛋白。一般來(lái)說(shuō),蛋白存在翻譯后修飾,其結構復雜度也是非常高的,所以,天然蛋白就是很好的抗原,只是需要做好純化操作;
2、高純度的重組蛋白。天然蛋白既然可以用作抗原,重組蛋白自然也可以。而且生產(chǎn)過(guò)程更容易掌控,也可以根據需求進(jìn)行設計,當然了,純化依然是必不可少的一個(gè)方面;
3、人工合成的多肽。合成的多肽也能在 一定程度上影響到機體,使得其產(chǎn)生免疫反應。但是,一般來(lái)說(shuō)多肽的分子量都較小,需要將多肽連到一個(gè)較大載體來(lái)增加其免疫原性;
抗原設計時(shí)需要注意的問(wèn)題有哪些?
1、序列的外源性。設計出的序列不能和動(dòng)物體內的序列相同,否則很難產(chǎn)生免疫反應;
2、蛋白的親疏水性。對于蛋白來(lái)說(shuō),親水端一般顯露在外,而疏水端則隱藏在內部,所以,設計的片段盡量選擇親水;
3、N端與C端的選擇。對于抗原來(lái)說(shuō),末端肽段效果要優(yōu)于中間段肽段;
4、多肽的長(cháng)度。一般來(lái)說(shuō),一個(gè)抗原決定簇由6-8個(gè)氨基酸組成,所以,多肽的長(cháng)度不能少于6個(gè)氨基酸;
無(wú)論對于抗原還是抗體來(lái)說(shuō),都需要保持其高純度。純度越高,其可能產(chǎn)生的非目的性免疫反應就會(huì )越小,目的蛋白的比重就會(huì )越高。當然了,作為抗原,不能有太大的毒性,既要讓機體產(chǎn)生免疫原性,又要不對機體造成太大影響。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供抗原制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。