聯(lián)系我們
細胞轉染實(shí)驗可以說(shuō)是生物實(shí)驗中的一道難關(guān)，做得好的話(huà)，可以大大降低實(shí)驗難度;如果轉染率低，那么，再昂貴的細胞也只能報廢。有鑒于此，普健生物今天在這里和大家具體聊聊有關(guān)細胞轉染的那些事。
一般來(lái)說(shuō)，我們可以通過(guò)三個(gè)途徑來(lái)進(jìn)行細胞轉染：物理介導、化學(xué)介導和生物介導。
物理介導：直接通過(guò)電穿孔、顯微注射、基因槍等工具，將基因注入到細胞內部的方式;
化學(xué)介導：相對來(lái)說(shuō)，化學(xué)介導的方法要多一些，比如通過(guò)磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉染法等;
生物介導：一般采用病毒介導轉染技術(shù)來(lái)實(shí)現;
對于細胞轉染來(lái)說(shuō)，需要轉染效率高一級細胞毒性小等特點(diǎn)。所以，隨著(zhù)技術(shù)的發(fā)展，病毒介導的方式使用的越來(lái)越多，因為它能同時(shí)滿(mǎn)足如上的兩種需求。只不過(guò)，這種方法需要的技術(shù)水平較高，一般實(shí)驗室較難達到要求。
常用的轉染技術(shù)有哪些?
就現在而言，常用的轉染技術(shù)主要有兩種：瞬時(shí)轉染和穩定轉染。
瞬時(shí)轉染(transient transfection)：不會(huì )將外源的DNA/RNA整合到宿主染色體上，而且一個(gè)宿主細胞可以存在多個(gè)拷貝數，一般來(lái)說(shuō)生產(chǎn)水平非常的高，但是持續時(shí)間要短很多(通常只能持續2-3天);
穩定轉染(Stable transfected)：會(huì )將外源DNA/RNA整合到宿主染色體上(也可能作為游離體)。外源DNA在染色體中的表達量低;
對于瞬時(shí)轉染和穩定轉染來(lái)說(shuō)，不存在那個(gè)方法更好的說(shuō)法，只是說(shuō)，在不同實(shí)驗需求中，哪個(gè)方法更加合適。對于那些理想的既能保證高轉染率，又能低細胞毒素的情況，幾乎不能能完全實(shí)現。只有最合適的方法，沒(méi)有最完美的方法。更多細胞轉染知識，敬請關(guān)注武漢普健生物。
