什么是抗體庫?噬菌體抗體庫如何構建?

　　對單克隆抗體和多克隆抗體有一定的了解后，我們又發(fā)現了一個(gè)新的詞：抗體庫，也有稱(chēng)之為抗體文庫的。因為在涉及噬菌體展示技術(shù)的時(shí)候，常常會(huì )提到一個(gè)詞：噬菌體展示文庫。以前一直不明天，為什么要這么表述。有鑒于此，今天普健生物就和大家一起學(xué)習學(xué)習。

　　首先，什么是抗體庫?

　　顧名思義，抗體庫指的就是機體在受到抗原刺激后，產(chǎn)生的一系列特異性抗體的總和。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，就是某種抗原刺激機體后，會(huì )產(chǎn)生各類(lèi)抗體，這些抗體的混合物則被稱(chēng)為抗體庫。

　　噬菌體抗體庫的構建流程為何?

　　1、提取RNA。通過(guò)離心、震蕩、靜置等一系列的手段，提取無(wú)RNA酶的RNA;

　　2、反轉錄。將提取出來(lái)的RNA通過(guò)反轉錄的方式，獲得cDNA;

　　3、抗體片段擴增。通過(guò)反轉錄cDNA中擴增特定的抗體片段，對其進(jìn)行片段擴增;

　　4、克隆到噬菌體上。將擴增所得的多樣DNA進(jìn)行抗體基因序列和噬菌體載體的酶切，將所需片段克隆到噬菌體質(zhì)粒上;

　　5、轉化菌庫。通過(guò)對其連接產(chǎn)物進(jìn)行電轉和培養后，獲得菌庫;

　　6、擴增并純化。將上一步的菌體混合物進(jìn)行培養后，通過(guò)相關(guān)操作對其進(jìn)行擴增和純化，最終獲得數量足夠的抗體庫;

　　當然了，如上我們也只是和大家簡(jiǎn)單聊了一下大概的步驟，真是操作的復雜程度非一兩句可以描述得了的。如果您有興趣，可以在我們之前發(fā)布的文章“納米抗體之噬菌體文庫構建過(guò)程詳解”中進(jìn)行詳細了解。當然了，如果您想要構建噬菌體抗體庫，您也可以直接聯(lián)系普健生物，我們擁有15年蛋白抗體制備經(jīng)驗，為您提供最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，歡迎您的來(lái)電咨詢(xún)。

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