單B細胞技術(shù)是現階段單克隆抗體制備的主要方法,其保留了輕重鏈可變區的天然配對,具備快捷、細胞數量少、高效等優(yōu)勢。單B細胞技術(shù)通過(guò)直接擴增單B細胞的VH和VL編碼基因,從而生產(chǎn)出高質(zhì)量的單克隆抗體。那么,單B細胞技術(shù)的具體流程是怎樣的?
1、單個(gè)B細胞分離
從淋巴組織中分離出單B細胞,而后通過(guò)顯微操作、激光捕獲顯微切割以及熒光激活細胞分選等技術(shù),中挑選出具備特異性的細胞;
2、單B細胞抗體測序及克隆
通常我們會(huì )采用96孔板進(jìn)行單細胞的cDNA合成,而后通過(guò)相應的技術(shù)手段對其進(jìn)行擴增。而后將表達載體轉染到哺乳動(dòng)物細胞中,而后對單克隆抗體進(jìn)行體外表達;
3、抗體表達及篩選
鑒定抗體片段的特異性和生物活性,而后將攜帶有目的抗體的表達載體在對應的表達載體中進(jìn)行表達。
其實(shí)大家不難看出,單B細胞技術(shù)開(kāi)發(fā)和雜交瘤細胞抗體表達有著(zhù)很多相似之處,只是在細胞制備最初階段有著(zhù)一定的區別,之后的過(guò)程都非常的類(lèi)似。作為現階段能夠制備高質(zhì)量單克隆抗體的熱門(mén)方式,單B細胞技術(shù)將會(huì )得到進(jìn)一步的開(kāi)發(fā),活得更好的制備方式。普健生物專(zhuān)業(yè)為您提供單B細胞單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。