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我們在利用哺乳動(dòng)物表達蛋白時(shí)，因為其能夠更好的促使蛋白進(jìn)行正確的折疊和修飾功能實(shí)現，所得所得蛋白更加接近天然蛋白的狀態(tài)，所以，利用其制備的藥品在效果方面更好。我們知道，在利用哺乳動(dòng)物蛋白表達系統時(shí)，常常會(huì )通過(guò)兩種方式：瞬時(shí)轉染和穩定轉染。那么，這兩種方法有哪些方面的不同呢?
瞬時(shí)轉染和穩定轉染之間有哪些不同?
其實(shí)就操作而言，瞬時(shí)轉染和穩定轉染大體相同，都是將目的蛋白轉染到哺乳動(dòng)物體內，利用其蛋白表達過(guò)程表達目的蛋白。但是，瞬時(shí)轉染并沒(méi)有將目的蛋白轉染到細胞染色體上，而是轉染至游離的載體上，這樣能夠讓我們在短時(shí)間內獲得大量目的蛋白。這個(gè)方法只能短時(shí)間內獲得蛋白，但是隨著(zhù)細胞的繁殖，會(huì )導致外源基因的丟失，最終無(wú)法生產(chǎn)目的蛋白;
而穩定轉染則是將目的蛋白轉染到細胞染色體上，而后隨著(zhù)原細胞蛋白的表達而表達。這個(gè)方法不會(huì )造成目的基因的丟失，能夠長(cháng)期穩定地進(jìn)行目的蛋白表達;
瞬時(shí)轉染和穩定轉染在操作上存在哪些方面的不同?
1、瞬時(shí)轉染選擇的質(zhì)粒不需要有抗性，而穩定轉染所需質(zhì)粒需要有一定的抗性來(lái)進(jìn)行后期的克隆株篩選;
2、瞬時(shí)轉染的操作相對簡(jiǎn)單，只要在質(zhì)粒構建好后，通過(guò)細胞復蘇、轉染、培養、蛋白純化等一系列的操作后即可獲得目的蛋白。而穩定轉染則需要構建好質(zhì)粒線(xiàn)性化，導入細胞，而后將轉染后的質(zhì)粒與細胞進(jìn)行融合，再通過(guò)篩選、培養等一系列的步驟后再構建相應的穩定細胞系(穩定轉染可以實(shí)現長(cháng)期穩定地生產(chǎn)蛋白);
總的來(lái)說(shuō)，我們在進(jìn)行哺乳動(dòng)物蛋白表達時(shí)，完全可以根據需求來(lái)進(jìn)行瞬時(shí)轉染或穩定轉染，當短期需要蛋白時(shí)，選擇瞬時(shí)轉染，長(cháng)期需要蛋白時(shí)，選擇穩定轉染。當然了，具體選擇也需要結合相關(guān)成本和技術(shù)支持來(lái)選擇。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供哺乳動(dòng)物蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
