在兔單克隆抗體制備的過(guò)程中,常常會(huì )因為這樣或那樣的原因導致實(shí)驗的失敗,很多時(shí)候是一些細節操作方面的問(wèn)題導致,其他則是因為實(shí)驗設計方面的問(wèn)題。有鑒于此,普健生物在這里和大家盤(pán)點(diǎn)有關(guān)兔單克隆抗體制備過(guò)程中的一些常見(jiàn)問(wèn)題及其解決辦法。
1、抗體產(chǎn)量低
這也是抗體制備中最常見(jiàn)的一個(gè)問(wèn)題,導致這個(gè)現象的原因也很多??梢酝ㄟ^(guò)提高抗原免疫方案、增加免疫次數或者通過(guò)使用強化佐劑的方式來(lái)提升其免疫反應;
2、抗體特異性不足
所得抗體的特異結合性較差,會(huì )和非目標蛋白相結合。當碰到這種情況時(shí),我們可以選擇重新選擇抗原,優(yōu)化抗原純度;
3、抗體親和力不足
一般來(lái)說(shuō),出現這種現象的原因是因為兔單抗的親和力不足導致??梢酝ㄟ^(guò)調整免疫方案、優(yōu)化抗原選擇以及優(yōu)化純化步驟等方式來(lái)提升抗體親和力;
4、雜交瘤細胞融合率低
可能是因為溫度、環(huán)境等融合條件選擇不合適。我們可以通過(guò)優(yōu)化融合條件,結合細胞的特性,設置合適的融合環(huán)境,或者嘗試其他融合方法;
5、抗體穩定性差
主要是因為單克隆細胞缺乏穩定性,從而導致抗體產(chǎn)量不穩定。我們可以通過(guò)不定期測試細胞穩定性來(lái)提升所得抗體的穩定性,也可以通過(guò)選擇更加穩定的單克隆抗體細胞進(jìn)行擴增來(lái)提升抗體的穩定性;
6、抗體受到污染
主要原因是因為細胞或抗原受到污染??梢酝ㄟ^(guò)適當地提升純度來(lái)解決;
當然了,在實(shí)驗過(guò)程中,我們需要做好相應的實(shí)驗記錄,并記錄好詳細的實(shí)驗步驟,以便于后期進(jìn)行相關(guān)查詢(xún)。在兔單克隆抗體制備的過(guò)程中,我們需要注意好相關(guān)細節問(wèn)題,做好相應的優(yōu)化和調整策略,這樣,才能更好地保證抗體的制備。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供兔單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。