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在納米抗體制備過(guò)程中，羊駝免疫可以說(shuō)是制備的起點(diǎn)，只有這個(gè)過(guò)程進(jìn)行得順利，后續的實(shí)驗才能夠得以進(jìn)行。那么，羊駝免疫的具體過(guò)程您知道嗎?今天，普健生物就在這里和大家一一介紹。
1、抗原準備。一般來(lái)說(shuō)，一只羊駝可以同時(shí)免疫1-3個(gè)抗原，劑量保持在1-2mg之間，在免疫前，我們需要將抗原與佐劑以1:1的比例進(jìn)行混合，并在4度環(huán)境下保持一段時(shí)間;
2、免疫羊駝。記錄羊駝耳號，而后從羊駝頸部靜脈2點(diǎn)注射，每點(diǎn)注射0.4mL混合液。觀(guān)察半小時(shí)后，如果羊駝狀態(tài)良好，則每2周再免疫一次;
3、采血。4次免疫后，每隔5-7天采血一次，每次50mL;
4、血清分離。每次采血都從其中抽取5mL血液進(jìn)行預冷，而后在25度環(huán)境下進(jìn)行離心，30分鐘后去其上層血清用于抗體效果評價(jià);
5、淋巴細胞提取。在離心管中加入分離液，然后以1:1的比例加入血液(注：注入血液時(shí)要緩慢注入，防止血液與分離液混合)，之后離心30分鐘，而后將上層血清保存到新的離心管中，-80度保存。取出其中棉狀免疫細胞至新的理線(xiàn)管中，加入PBS緩沖液，25度下離心20分鐘，去除上清液，根據細胞數目溶解分離出淋巴細胞溶液，-80度保存;
關(guān)于免疫中需要注意的一些事項：
1、羊駝和抗原的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗的成敗，所以，我們盡量要選擇健康強壯狀態(tài)良好的羊駝，并選擇合適純度的免疫抗原;
2、淋巴液需要及時(shí)分離提取，這樣才能在更大程度上防止溶血情況的出現;
3、免疫周期也可能會(huì )影響到免疫效果，一般1-2周間隔免疫最好;
總的來(lái)說(shuō)，羊駝免疫過(guò)程中需要注意到的事項很多，但是如果我們按照實(shí)驗規范嚴格操作的話(huà)，就能有效提升實(shí)驗的成功率。對于大部分的客戶(hù)來(lái)說(shuō)，自己免疫的成功率和成本投入量是非常高的，這個(gè)時(shí)候我們就可以考慮直接購買(mǎi)納米抗體的方式，所得的納米抗體無(wú)論是質(zhì)量上還是純度上都能夠達到實(shí)驗要求。更多納米抗體制備知識，盡在普健生物。
