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蛋白表達中我們常用的方法主要有四種：大腸桿菌表達系統、桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統、酵母表達系統以及哺乳動(dòng)物表達系統。這四種表達方式各具特點(diǎn)，當然也各有不足之處，結合我們的需求，從中選擇最適合我們的表達方式。今天，普健生物在這里和大家具體聊聊昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統。
相對其他三種表達系統拉說(shuō)，桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統具備安全性好、重組蛋白表達量高、蛋白修飾后翻譯完整且容易實(shí)現大規模生產(chǎn)，使得其在蛋白表達行業(yè)有著(zhù)廣泛的應用。昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統主要采用昆蟲(chóng)桿狀病毒為載體，同時(shí)采用昆蟲(chóng)細胞為載體來(lái)進(jìn)行蛋白表達。
但是昆蟲(chóng)桿狀病毒表達相比其他表達系統來(lái)說(shuō)，蛋白表達量要低一些，那么，是否有其他辦法可以提升其表達水平呢?答案是肯定的。
方法一：抑制蛋白降解酶的產(chǎn)生
在采用病毒進(jìn)行蛋白表達時(shí)，病毒本身就會(huì )產(chǎn)生蛋白酶，它會(huì )對重組蛋白進(jìn)行降解。這個(gè)時(shí)候，我們就需要對其進(jìn)行一些基因方面的調整個(gè)，或者通過(guò)添加一些緩沖液，降低其降解速度;
方法二：調控目的基因轉錄
通過(guò)實(shí)驗我們了解到，多角體基因的下游序列一般都會(huì )對下游序列的外源基因表達產(chǎn)生影響。如果改變外源基因的終止密碼子，則會(huì )對目的基因的表達產(chǎn)生影響，所以，我們在進(jìn)行目的基因表達的時(shí)候，可以增強其啟動(dòng)因子;
方法三：優(yōu)化啟動(dòng)子
在不同的啟動(dòng)子控制下，蛋白表達的水平存在著(zhù)很大的差異。一般來(lái)說(shuō)，P10啟動(dòng)子和堿性啟動(dòng)子的效果較好，其他啟動(dòng)子或多或少都存在著(zhù)一些不足之處。所以，我們在進(jìn)行蛋白表達的時(shí)候，可以?xún)?yōu)先考慮著(zhù)兩種啟動(dòng)子;
方法四：使用活體昆蟲(chóng)表達蛋白
和昆蟲(chóng)培養不同，采用幼蟲(chóng)或蛹表達蛋白的水平能夠顯著(zhù)提升，而且在很多實(shí)驗中已經(jīng)證明，采用幼蟲(chóng)能夠高效提升許多真核生物蛋白的制備;
當然了，昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統也存在著(zhù)一些不足之處，但是在各個(gè)領(lǐng)域內卻也占據這重要的地位。而且隨著(zhù)這一表達系統研究的不斷深入，其調理機制也變得愈發(fā)的清晰，相信在未來(lái)，其使用將會(huì )變得更加的廣泛。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白表達服務(wù)，四大表達方式，根據您的需求來(lái)選擇。
