昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統是目前最常用的五大蛋白表達系統之一(哺乳動(dòng)物表達系統、桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統、大腸桿菌表達系統、酵母表達系統、枯草芽孢桿菌表達系統)。其原理是通過(guò)用桿狀病毒去感染昆蟲(chóng)細胞來(lái)表達蛋白的方式。那么,相比其他蛋白表達系統來(lái)說(shuō),昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統的優(yōu)勢體現在哪些方面呢?
昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統的優(yōu)勢:
1、操作簡(jiǎn)單。桿狀病毒的基因組較小,分子生物學(xué)特性簡(jiǎn)單,相比其他表達系統來(lái)說(shuō),操作更加簡(jiǎn)單;
2、安全性高。桿狀病毒的安全性好,蛋白表達中無(wú)需進(jìn)行額外操作;
3、外源基因攜帶量大??梢约尤敫鞣N外源基因;
4、可折疊與修飾。能夠進(jìn)行正確的折疊以及翻譯后修飾性操作;
昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統的實(shí)驗步驟:
1、載體構建。將目標基因插入到桿狀病毒中,通常采用線(xiàn)性或環(huán)狀的DNA質(zhì)粒;
2、細胞轉染。將構建好的表達載體利用桿狀病毒轉染到昆蟲(chóng)細胞中,使得目標基因合理插入到細胞染色體中;
3、蛋白表達。通過(guò)對細胞進(jìn)行擴增,而后實(shí)現目的蛋白在宿主細胞內的轉錄和表達,以達到目標蛋白的大量表達;
4、蛋白檢測及純化。對目的蛋白的特異性和親和力進(jìn)行檢測,如果檢測目的蛋白符合需求,則對蛋白進(jìn)行純化;
在昆蟲(chóng)桿狀病毒表達時(shí),我們盡量去選擇合適的表達載體,對轉染條件進(jìn)行優(yōu)化,并設計好實(shí)驗的步驟,這樣才能在更大程度上保障蛋白的表達。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白表達服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。