蛋白表達服務(wù)是一種有專(zhuān)業(yè)蛋白表達公司提供的特定蛋白表達服務(wù),通過(guò)利用各種技術(shù)手段,為客戶(hù)提供高特異性、高親和力的蛋白產(chǎn)品。蛋白表達一般需要選擇合適的表達系統,配合基因手段,就能夠實(shí)現目的蛋白表達。
蛋白表達的常見(jiàn)步驟是怎樣的?
1、基因克隆。根據設計,將目的基因序列克隆到表達載體中;
2、表達條件優(yōu)化。根據蛋白的性質(zhì),提出相應的表達條件優(yōu)化方法,并根據宿主細胞的特性,優(yōu)化相關(guān)表達環(huán)境;
3、細胞轉染及克隆。將表達載體轉染到宿主細胞中,而后調整相關(guān)培養條件,以確保宿主細胞正常表達目的蛋白;
4、蛋白純化。結合蛋白的特性,選擇合適的純化方法(比如親和層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析等),分離出目的蛋白;
5、蛋白驗證。對所得蛋白進(jìn)行相關(guān)特性驗證(如純度、活性以及結構等);
6、蛋白大規模生產(chǎn)。蛋白驗證通過(guò)后,則開(kāi)始蛋白的大規模生產(chǎn);
但是,在蛋白表達過(guò)程中常常會(huì )出現各種問(wèn)題,下面,普健生物和大家具體聊聊會(huì )影響到蛋白表達的因素。
1、蛋白特性。蛋白分子大小、蛋白來(lái)源、是否毒性、翻譯后修飾程度、結構復雜等特性,都會(huì )影響到蛋白的表達量,所以,需要結合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行調整;
2、宿主選擇。宿主細胞的本身特性會(huì )在極大程度上影響到蛋白的表達;
3、質(zhì)粒選擇。載體是攜帶外源基因的重要工具,合適的載體能更好的促進(jìn)蛋白表達,不合適的載體則會(huì )影響到蛋白的表達;
4、標簽選擇。標簽的選擇能夠使得蛋白純化變得更加容易,反之則會(huì )造成影響到蛋白的表達;
5、系統優(yōu)化。根據蛋白的特性,選擇合適的蛋白表達系統,并根據蛋白特性來(lái)優(yōu)化蛋白表達過(guò)程;
在蛋白表達的過(guò)程中,常常會(huì )遇到這樣或那樣的問(wèn)題,所以,蛋白表達系統的選擇以及表達過(guò)程的優(yōu)化就顯得尤為重要了。在日常蛋白表達過(guò)程中,我們需要嚴格按照實(shí)驗室標準操作,同時(shí)需要注意好各表達細節,這樣才能在更大程度上實(shí)現蛋白的表達。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白表達服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。