關(guān)于真核蛋白表達系統您了解多少?

　　真核蛋白表達技術(shù)是是一種在生物藥品制備以及生物研究領(lǐng)域有著(zhù)廣泛使用的蛋白技術(shù)，通過(guò)將外源基因轉染之真核細胞中，使得目標蛋白得以表達。相比原核表達系統來(lái)說(shuō)，真核蛋白表達系統能夠更好地進(jìn)行折疊以及翻譯后修飾工作，更適合于表達那些功能性更強的蛋白。

　　真核蛋白表達的原理：

　　真核蛋白表達的原理是通過(guò)技術(shù)手段將外源基因導入到真核細胞內，利用宿主細胞的生物機制合成目標蛋白的過(guò)程。通過(guò)基因克隆、轉染、轉錄后翻譯、翻譯后修飾、蛋白純化、蛋白分析等一系列的手段來(lái)實(shí)現蛋白表達;

　　真核蛋白表達的流程：

　　1、基因克隆。將目標基因克隆到真核表達載體中，當然了，根據需求進(jìn)行啟動(dòng)子、標記以及調控元件等元件的選擇;

　　2、細胞培養。將所得載體轉染到真核細胞中，而后再通過(guò)細胞培養，使得其具備蛋白表達的能力;

　　3、細胞篩選。從所得細胞中篩選出能夠正常表達目標蛋白的細胞，并通過(guò)細胞裂解來(lái)獲得目的蛋白;

　　4、蛋白純化。通過(guò)層析、透析、離心、沉淀等一系列的手段提升目的蛋白的純度;

　　常用的真核蛋白表達方法：

　　1、哺乳動(dòng)物表達系統。采用哺乳動(dòng)物細胞為載體表達蛋白，適合大規模表達復雜蛋白;

　　2、昆蟲(chóng)桿狀病毒表達系統。采用桿狀病毒攜帶目的基因轉染昆蟲(chóng)細胞的方式來(lái)表達蛋白，適合一些較為簡(jiǎn)單的真核蛋白表達，具備制備成本低、操作簡(jiǎn)單等方式;

　　3、酵母表達系統。采用酵母細菌表達目標蛋白的方式，適合于表達一些中等規模的蛋白，對于那些較大規模以及高密度表達的蛋白;

　　綜上所述，我們需要結合蛋白的性質(zhì)和需求來(lái)選擇合適的蛋白表達系統，通過(guò)對培養條件、轉染條件等方式來(lái)提升蛋白的表達效率。當然了，我們在進(jìn)行蛋白表達過(guò)程中，需要選擇合適的蛋白純化方法，避免對蛋白造成影響。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供真核蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。