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在重組蛋白表達時(shí)，我們常常通過(guò)將外源基因導入到細胞內，讓其隨著(zhù)細胞蛋白的表達而表達，從而獲得目標蛋白的方式。這個(gè)過(guò)程，我們稱(chēng)之為細胞轉染。細胞轉染的實(shí)現過(guò)程有很多，比如化學(xué)轉染法、物理轉染法、生物轉染法等等?？梢哉f(shuō)，細胞轉染是實(shí)現基因編輯、蛋白表達、信號傳導等一系列研究的重要方法。
細胞轉染現階段主要有兩種：穩定轉染和瞬時(shí)轉染(關(guān)于穩定轉染和瞬時(shí)轉染的相關(guān)知識以及穩定細胞株構建的步驟，大家可以點(diǎn)擊“哺乳動(dòng)物蛋白表達瞬時(shí)轉染與穩定轉染之間有哪些不同?”查看)。
細胞轉染的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些?
1、哪些因素會(huì )影響到細胞的轉染率
質(zhì)粒。質(zhì)粒的選擇從直接上關(guān)系到轉染的效率，其濃度也會(huì )在極大程度上影響著(zhù)轉染的效率(一般不要低于1000ng/uL);
細胞。首先要保證所選是一個(gè)活性較高的細胞，對于不同的細胞來(lái)說(shuō)，轉染方法和試劑的選擇不同，轉染的效率也會(huì )存在極大的差異;
方法。按照說(shuō)明書(shū)來(lái)選擇合適的轉染方法，并確定好最佳的轉染條件;
2、細胞轉染無(wú)法提高轉染率要怎么解決
當出現細胞轉染效率低的情況時(shí)，可以選通過(guò)構建穩定細胞株的方式，或者通過(guò)藥物的加壓篩選來(lái)進(jìn)行，這樣一般都能解決轉染效率低的情況;
3、怎么選擇合適的細胞轉染
目前常用的轉染方法主要有物理轉染法以及化學(xué)試劑等轉染方法，但是也各具優(yōu)缺點(diǎn)。比如物理轉染法需要使用到一些昂貴的儀器，一般的實(shí)驗室無(wú)法滿(mǎn)足這些要求;而化學(xué)轉染法使用相對更加廣泛，價(jià)格便宜、操作簡(jiǎn)單，但是只能用于一些較為常規的細胞，對于一些個(gè)性化的細胞轉染效率則會(huì )相對低下;
細胞轉染作為外源基因的引入方式，可以說(shuō)在直接上關(guān)系著(zhù)蛋白表達的效率或成功率，可以說(shuō)是蛋白表達成功的第一步。所以，如何選擇載體并構建好合適的轉染環(huán)境，在極大程度上制約著(zhù)蛋白的表達。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
