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桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統是現如今使用最為廣泛的表達系統之一，其不僅能有效提升蛋白表達效率，而且安全性好，具備良好的生物活性。而且因為其通過(guò)感染昆蟲(chóng)細胞或幼蟲(chóng)來(lái)表達外源蛋白，所以不會(huì )對哺乳動(dòng)物產(chǎn)生任何致病性，因此，自誕生以來(lái)，就得到了廣泛的應用。那么，桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統的具體涉及理念及其構建方法是怎樣的呢?下面，普健生物就和大家具體聊聊。
桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統的設計理念是怎樣的?
其實(shí)和哺乳動(dòng)物表達系統一樣，桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統也是通過(guò)將外源基因通過(guò)剪切、對接等方式，將外源基因加入到昆蟲(chóng)細胞中，而后讓目的蛋白隨著(zhù)昆蟲(chóng)細胞的表達而表達。之后再通過(guò)蛋白析出、純化等一系列的操作，最終獲得我們所需蛋白的方式。
桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統的構建方法是怎樣的?
和哺乳動(dòng)物表達系統不同，桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統主要分為兩種：在昆蟲(chóng)細胞內重組和在昆蟲(chóng)細胞外重組。
在昆蟲(chóng)細胞內重組：
最早期常用這個(gè)方法，通過(guò)將未加修飾的野生病毒進(jìn)行重組，后來(lái)發(fā)展成采用線(xiàn)性化的病毒DNA替代，將其與轉染載體進(jìn)行昆蟲(chóng)細胞共轉染時(shí)，只要不發(fā)生同源重組，那么，重組率則會(huì )高達100%;
而后，大家對這個(gè)方法進(jìn)行了改良，比如直接克隆等方法，不僅能避免大腸桿菌內的重組，也能有效加速重組的過(guò)程。
在昆蟲(chóng)細胞外重組：
通過(guò)將外源基因重組到病毒基因中去 ，而且只用重組桿狀病毒DNA去轉染昆蟲(chóng)細胞。當然了，隨著(zhù)技術(shù)的發(fā)展，有科協(xié)家利用噬菌體編碼重組酶，讓其提高重組效率，而后在通過(guò)染色等手段進(jìn)行重組體的鑒定等;
總的來(lái)說(shuō)，桿狀病毒昆蟲(chóng)表達系統在一定程度上解決了其他表達系統的不足之處，無(wú)論在方法還是在制備成本上都有著(zhù)一定的優(yōu)勢，但是也有著(zhù)一定的不同。不過(guò)，我們相信，隨著(zhù)技術(shù)的不斷發(fā)展，在后期其一定會(huì )得到更好的利用。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
