昆蟲(chóng)表達系統表達蛋白的優(yōu)缺點(diǎn)及其制備步驟

　　昆蟲(chóng)表達系統相信大家都不會(huì )陌生，它是四大蛋白表達系統之一(主要包含：原核細胞表達系統、酵母表達系統、昆蟲(chóng)表達系統以及哺乳動(dòng)物表達系統)。關(guān)于昆蟲(chóng)表達系統我們在前面和大家簡(jiǎn)單介紹過(guò)，今天我們再和大家具體聊聊有關(guān)昆蟲(chóng)表達系統的優(yōu)缺點(diǎn)及其詳細的制備步驟。

　　昆蟲(chóng)表達系統的優(yōu)點(diǎn)：

　　1、能夠輕松時(shí)間糖基化、乙?；?、磷酸化等翻譯修飾操作;

　　2、分子特性相對簡(jiǎn)單，使得其操作起來(lái)更加的簡(jiǎn)單;

　　3、因為其細胞能夠懸浮生長(cháng)，使得其培養起來(lái)更加的簡(jiǎn)單;

　　4、對于外源基因能夠實(shí)現高效表達且其繁殖不受外源基因影響;

　　昆蟲(chóng)表達系統的步驟：

　　1、引物設計與合成

　　選擇合適的基因序列，并將目的基因引入到序列中;

　　2、基因擴增與克隆

　　通過(guò)所得RNA進(jìn)行反轉率，合成我們所需的cDNA，并以cDNA為模板，對其進(jìn)行擴增和測序;

　　3、病毒質(zhì)粒構建

　　將擴增所得基因克隆到質(zhì)粒中，并對其進(jìn)行培育、擴增;

　　4、表達蛋白

　　通過(guò)設計合理的表達環(huán)境，對所得基因序列進(jìn)行表達，獲得蛋白表達產(chǎn)物的混合液;

　　5、蛋白純化及鑒定

　　通過(guò)蛋白純化的手段對蛋白進(jìn)行提取和純化，并對純化后的蛋白進(jìn)行鑒定，以測定所得蛋白是否符合我們需求;

　　大家應該不難看出，昆蟲(chóng)表達系統和其他表達系統的表達步驟之間并不存在太大的差別，只是在選擇宿主方面存在著(zhù)不同，其他步驟大概類(lèi)似。但是，想要表達成功，則有很多細節方面需要引起注意，而恰恰是這些細節制約著(zhù)所得蛋白是否能夠滿(mǎn)足需求。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供昆蟲(chóng)表達蛋白服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。

本文網(wǎng)址：http://www.myluminousbirth.com/archive/623.html，轉載請標明出處，謝謝！