納米抗體作為一種廣泛使用的小分子抗體,因為其體積小、特異性強、穩定性好等一系列特點(diǎn),使得其在診斷和臨床中都有著(zhù)廣泛的使用。有些時(shí)候,我們會(huì )根據客戶(hù)的需求來(lái)設計相應的納米抗體產(chǎn)品,以滿(mǎn)足可以在抗體某些特性方面的需求,這類(lèi)抗體我們通常稱(chēng)之為納米抗體定制服務(wù)。那么,如何獲得高質(zhì)量定制型納米抗體呢?
我知道,納米抗體的表面大概有10個(gè)氨基酸與人的不同,VHH中有4個(gè)突變氨基酸增加了VHH的水溶性,所以,我們可以通過(guò)對VH序列進(jìn)行優(yōu)化,以達到納米抗體人源化的目的。同時(shí),針對特異性靶點(diǎn)設計,對納米抗體進(jìn)行相應的設計,以達到納米抗體實(shí)現相關(guān)功能的目的。其中包括抗原檢測、羊駝免疫、采血、效價(jià)檢測、納米抗體噬菌體庫構建以及淘選等一系列方法,實(shí)現表達、檢測的一站式服務(wù)。其過(guò)程如下:
1、靶點(diǎn)免疫羊駝。通過(guò)四輪免疫之后,進(jìn)行采血并從其中提取PBMC,通過(guò)所提取的mRNA反轉錄獲得cDNA,并擴增獲得VHH可變片段;
2、羊駝納米抗體庫構建。通過(guò)獲得的VHH可變區植入到噬菌體中,通過(guò)噬菌體展示,獲得庫容為8.76*10^9的納米抗體庫;
3.、納米抗體庫淘選及篩選。通過(guò)靶點(diǎn)蛋白對構建的羊駝納米抗體庫進(jìn)行三輪挑選后,排除重復序列,篩選出7條不同的抗體序列,并將這些抗體徐磊注入到可溶性VHH抗體蛋白中,進(jìn)行再次驗證;
總的來(lái)說(shuō),通過(guò)如上一系列的操作,不僅能獲得純度更高的納米抗體庫,也能獲得特異性更好的納米抗體。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供納米抗體定制服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎前來(lái)咨詢(xún)。普健生物還提供現下各種主流抗體制備產(chǎn)品,比如單B細胞抗體制備,歡迎咨詢(xún)。