30年來(lái),雜交瘤抗體制備依然是實(shí)驗室中單克隆抗體制備的主要技術(shù),在免疫組化以及各類(lèi)細胞生物學(xué)中發(fā)揮著(zhù)重大的作用。但是隨著(zhù)過(guò)去10年內基因重組技術(shù)的飛速發(fā)展,無(wú)論是組合庫還是抗體工程,尤其是在高端抗體制備領(lǐng)域都有著(zhù)重要的作用。那么,對于抗體制備的幾個(gè)過(guò)程您了解嗎?今天普健生物就和大家具體聊聊。
1、免疫動(dòng)物獲得抗體。這是一個(gè)相對傳統的過(guò)程,它通過(guò)將免疫原注射到宿主(小鼠、大鼠、兔等動(dòng)物)體內,以此來(lái)刺激動(dòng)物體內B細胞發(fā)生應答反應,從而分泌出對應的抗體。而后,我們再通過(guò)收集動(dòng)物血清,而后通過(guò)分離純化等過(guò)程,獲得多克隆抗體。
優(yōu)點(diǎn):成本低,技術(shù)要求低,生產(chǎn)周期短;
缺點(diǎn):需要使用大量動(dòng)物,而且不容易實(shí)現大規模生產(chǎn);
2、雜交瘤技術(shù)。通過(guò)價(jià)格B淋巴細胞與能夠無(wú)限增殖的骨髓瘤細胞結合,形成一個(gè)大細胞。這個(gè)細胞不僅能夠制備特異性抗體,而且能夠無(wú)限增殖能力。就工藝而言,先通過(guò)向動(dòng)物體內注射免疫原,而后收集脾臟B細胞,再通過(guò)體外融合技術(shù)對其進(jìn)行融合。之后在對細胞進(jìn)行體外篩選、培養,收集并純化上清液獲得抗體。
優(yōu)點(diǎn):特異性高、適合大批量生產(chǎn);
缺點(diǎn):操作步驟繁瑣、鼠源性較高;
3、基因工程技術(shù)。通過(guò)體外重組技術(shù),將抗體片段插入到特定的載體中,而后對其進(jìn)行擴增、培養,而后讓對片段在體外進(jìn)行轉錄、翻譯,最終得到我們所需的抗體。
優(yōu)點(diǎn):加速生產(chǎn),親和力高,人源化更便捷,易于大量生產(chǎn);
缺點(diǎn):技術(shù)繁瑣,成本投入更高;
當然了,隨著(zhù)技術(shù)的發(fā)展,很多新型的技術(shù)已經(jīng)被發(fā)明出來(lái)了,但是因為其僅適合于一些小眾的實(shí)驗,所以并未流行起來(lái)。但是,相信在不僅的將來(lái),更多的技術(shù)將會(huì )被發(fā)明并規?;褂贸鰜?lái)。普健生物專(zhuān)業(yè)為您提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
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