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雜交瘤細胞技術(shù)是最常用于制備單克隆抗體的方式，通過(guò)將骨髓瘤細胞與免疫后的B淋巴細胞相融合而形成的細胞。融合形成的這個(gè)細胞既可以避免B細胞無(wú)法無(wú)限增殖的缺點(diǎn)，又可以大量制備所需抗體。也正因為這個(gè)特性，使得其在臨床試驗中得到了廣泛的應用。那么，雜交瘤細胞技術(shù)的操作流程是怎樣的呢?
1、免疫小鼠。通過(guò)抗原提取或定制，得到純度較高的抗原，而后將其注入到小鼠體內。當然了，為了免疫成功，間隔一段時(shí)間后再次對小鼠進(jìn)行免疫，多輪免疫后，確保免疫成功;
2、細胞提取。當小鼠免疫成功后，提取出脾臟，并將其分離出來(lái);
3、細胞融合。將小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細胞;
4、細胞篩選。將雜交瘤細胞放入培養基中，通過(guò)相關(guān)技術(shù)手段，篩選出合適的雜交瘤細胞;
5、細胞擴增。將篩選出的雜交瘤細胞進(jìn)行擴增，并收集齊上清液;
6、蛋白純化。通過(guò)親和層析等技術(shù)，對所得單克隆抗體進(jìn)行純化;
7、蛋白鑒定。通過(guò)一些手段對單克隆抗體進(jìn)行特異性、親和力等方面特性的鑒定;
當然了，隨著(zhù)相關(guān)技術(shù)的不斷發(fā)展，各種單克隆抗體制備的技術(shù)營(yíng)運而生，如Single B兔單克隆抗體制備等技術(shù)。但是，其在技術(shù)需求方面有著(zhù)一定的要求，需要結合實(shí)際情況來(lái)選擇。
大規模單克隆抗體制備的流程是怎樣的?
對于大規模單克隆抗體制備來(lái)說(shuō)，在主要流程上大體相同，但是在一些細節方面有著(zhù)一定的不同。
1、免疫小鼠。將抗原注入小鼠體內，使得其產(chǎn)生免疫反應;
2、淋巴細胞分離。提取免疫成功后的小鼠脾細胞;
3、細胞融合。將脾細胞與骨髓瘤細胞進(jìn)行融合;
4、抗體篩選與鑒定。將雜交瘤細胞篩選和鑒定;
5、抗體生產(chǎn)。對雜交瘤細胞進(jìn)行擴增，大規模培養，而后實(shí)現抗體的大規模生產(chǎn);
相對其他抗體制備方式來(lái)說(shuō)，雜交瘤細胞技術(shù)無(wú)論是在制備技術(shù)要求上還是制備成本上都有著(zhù)極大的優(yōu)勢，適用于大部分抗體制備的情況。當然了，雜交瘤技術(shù)也有著(zhù)一定的局限性，比如操作步驟繁瑣、抗體鼠源性等，但是，相信隨著(zhù)技術(shù)的不斷發(fā)展，這些問(wèn)題將會(huì )得到解決。更多有關(guān)雜交瘤技術(shù)的相關(guān)知識，敬請關(guān)注普健生物。
