盤(pán)點(diǎn)雜交瘤細胞技術(shù)制備單克隆抗體會(huì )遇到的問(wèn)題

　　雜交瘤細胞制備抗體技術(shù)相信大家都不覺(jué)得陌生了，它就是一種將免疫后的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后產(chǎn)生單克隆抗體的傳統方法。如果想了解雜交瘤相關(guān)的具體知識，可以點(diǎn)擊“什么是雜交瘤測序?它的操作流程是怎樣的?”查看。今天，普健生物在這里簡(jiǎn)單和大家介紹一下有關(guān)雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)常見(jiàn)的一些問(wèn)題。

　　一、微生物污染

　　1、細菌和真菌污染一般都是因為操作不當所導致，除了實(shí)驗之前做好日常消殺外，還需要確保消毒劑的純度及質(zhì)量;

　　2、支原體污染則可能是因為血清制品以及相關(guān)實(shí)驗材料污染所導致，一般來(lái)說(shuō)，短期污染沒(méi)什么明顯變化，但是時(shí)間長(cháng)了之后可能會(huì )導致細胞生長(cháng)緩慢。所以，在購買(mǎi)相關(guān)產(chǎn)品的時(shí)候，要盡量保證相關(guān)產(chǎn)品的純度，減少不必要的麻煩;

　　3、原聲生物污染常見(jiàn)的主要為黑膠蟲(chóng)，污染后會(huì )出現一些小黑點(diǎn);

　　二、細胞不生長(cháng)

　　1、最常見(jiàn)的原因是因為融合試劑有毒，需要進(jìn)行替換;

　　2、使用的血清質(zhì)量很差，可以?xún)?yōu)先考慮胎牛血清;

　　3、添加劑比例不正常;

　　三、細胞不分泌抗體

　　1、細胞直接不分泌抗體一般來(lái)說(shuō)主要是因為抗原免疫性差所導致，脾臟損傷嚴重等;

　　2、后期分泌抗體越來(lái)越少主要因為骨髓瘤繁殖被抑制、克隆不及時(shí)以及染色體丟失等情況導致;

　　四、細胞克隆困難

　　1、對已有雜交瘤細胞進(jìn)行篩選;

　　2、在培養基中加入IL-6;

　　其實(shí)大家不難看出，導致雜交瘤細胞制備抗體困難或失敗的原因主要是因為細節方面的錯誤操作導致。所以，我們在日?？贵w制備時(shí)，不僅要嚴格按照實(shí)驗流程來(lái)，而且需要注意各個(gè)細節方面的問(wèn)題。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供雜交瘤制備單克隆抗體服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。