雜交瘤測序的定義及其制備流程-普健生物

　　雜交瘤測序是單克隆抗體制備中常用的一種手段，通過(guò)對雜交瘤細胞中的抗體基因序列進(jìn)行測序，而后記錄其結構信息的方式。而后在后續的抗體制備過(guò)程中，直接采用這個(gè)序列來(lái)制備抗體的方式。雜交瘤測序技術(shù)對于抗體的特異性和功能性是非常重要的，那么，其具體測序是怎樣的呢?今天，普健生物在這里和大家具體聊聊。

　　1、雜交瘤細胞構建。提取免疫后的淋巴B細胞，而后將其與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞;

　　2、細胞篩選。對所得雜交瘤細胞進(jìn)行培養，而后提取出其中融合成功的雜交瘤細胞(可以通過(guò)在其中添加抗生素等方法來(lái)實(shí)現)，而后對其進(jìn)行細胞株培養;

　　3、DNA或RNA提取。從篩選所得的細胞株中提取出DNA或RNA;

　　4、擴增。使用聚合酶鏈反應技術(shù)，而后對特定抗體基因片段進(jìn)行擴增，以便于從復雜的基因組序列中快速擴增出特定序列;

　　5、抗體測序。對所得抗體基因片段進(jìn)行測序(可以使用傳統的測序技術(shù)，也可以使用高通量的下一代測序技術(shù));

　　6、序列分析。多所得抗體序列進(jìn)行分析，識別其中的可變區和常數區，對抗體的特異性和功能性進(jìn)行進(jìn)一步分析;

　　通過(guò)如上的步驟就能夠讓我們獲得單克隆抗體的序列信息，通過(guò)雜交瘤測序，能夠為我們后續的研究提供重要的數據支持?？偟膩?lái)說(shuō)，所得序列可以讓我們保持后期抗體制備的特異性和穩定性，能夠在最大程度上降低抗體批次之間的差異性。如果您有相關(guān)雜交瘤測序的需求，歡迎聯(lián)系普健生物。