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雜交瘤技術(shù)也叫做單克隆抗體技術(shù)，它是一種在細胞融合技術(shù)上發(fā)展起來(lái)的抗體制備技術(shù)。雜交瘤細胞技術(shù)通過(guò)將骨髓瘤細胞與免疫的動(dòng)物脾細胞相融合，從而形成能夠無(wú)限增殖且可以生產(chǎn)單克隆抗體的細胞。那么，您對雜交瘤細胞抗體制備技術(shù)了解多少呢?今天普健生物在這里和大家具體聊聊。
雜交瘤細胞制備的主要步驟：
1、細胞的選擇與細胞融合
特異性抗體制備的一方必須是免疫后的B細胞，通常情況下，我們都會(huì )選擇面以后的動(dòng)物脾細胞，因為脾是B細胞的主要匯聚場(chǎng)所，只要發(fā)生免疫反應，脾臟中就一定會(huì )出現免疫應答。融合細胞的另外一方通常選擇骨髓瘤細胞，因為需要其擁有不斷繁殖的特性。
通常情況下，我們都會(huì )選擇細胞融合劑來(lái)進(jìn)行細胞的融合，它會(huì )對細胞膜造成一定的損傷，也使得細胞更加容易粘連在一起。一般來(lái)說(shuō)，我們會(huì )選擇聚乙二醇來(lái)充當細胞融合劑，在40%的濃度下，其能夠最低程度上對細胞造成損傷，同時(shí)又能產(chǎn)生最高頻的融合;
2、細胞培養
細胞融合是一個(gè)物理過(guò)程，在融合的過(guò)程中會(huì )出現呈現出各種樣式，比如脾-瘤細胞、脾-脾細胞、瘤-瘤細胞等。但是，正常的脾細胞在培養基中僅能存活5-7天，細胞多聚體也容易死去，所以，我們僅需將瘤細胞去除即可。而后，在對剩余的細胞進(jìn)行培養，以獲得我們所需細胞;
3、特異性抗體篩選
因為細胞的融合是一個(gè)隨機的過(guò)程，所以，我們需要有針對性地對其進(jìn)行篩選清除。一般來(lái)說(shuō)，篩選分為兩步：第一步是對融合細胞的抗體進(jìn)行篩選，第二步是對抗體進(jìn)行特異性篩選。一般來(lái)說(shuō)，我們可以對融合細胞進(jìn)行稀釋?zhuān)鶆蚍譃榈脚囵B板的每個(gè)孔中，培養后取上清液用ELISA法選出高分泌性的細胞(也就是我們常說(shuō)的克隆)。而后，對這些細胞再次進(jìn)行克隆化，找出其中陽(yáng)性細胞株，擴增后再進(jìn)行凍存、培養等操作;
當然了，雜交瘤細胞抗體篩選的過(guò)程更加地復雜，而且其中涉及到很多精細化操作，需要專(zhuān)業(yè)技術(shù)的人員進(jìn)行操作。而且有很多細節方面的工作需要引起注意，否則，很容易造成雜交瘤細胞融合不成功的現象。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供雜交瘤細胞抗體制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
