在單克隆抗體制備時(shí),我們常常會(huì )選擇雜交瘤抗體制備的方式來(lái)進(jìn)行,而雜交瘤測序是其中必不可少的一個(gè)過(guò)程。因為雜交瘤抗體測序不僅能更好地避免雜交瘤細胞失活甚至希望的風(fēng)險,而且能更好地保證后期抗體的一致性。那么,雜交瘤測序一般需要經(jīng)過(guò)哪些過(guò)程呢?今天,普健生物就和大家詳細描述一下。
1、樣本收集。從目標雜交瘤中收集細胞樣本,其中包含DNA或RNA;
2、核酸提取。使用核酸提取方法從樣本中提取出DNA或RNA(當然了,具體方法可以結合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇);
3、文庫構建。對于DNA測序,這通常涉及將DNA片段進(jìn)行片段化,然后連接到測序適配體上。對于RNA測序,通常先轉錄成cDNA,然后進(jìn)行片段化和適配體連接;
4、PCR擴增。對文庫中的DNA或RNA片段進(jìn)行PCR擴增,以增加其數量,以便進(jìn)行下一步的測序;
5、基因測序。使用測序技術(shù)對PCR擴增的文庫進(jìn)行測序;
6、數據分析。對產(chǎn)生的測序數據進(jìn)行生物信息學(xué)分析。包括將測序reads映射到參考基因組或轉錄組上,進(jìn)行拼接、變異檢測、基因表達分析等;
7、結果解釋。根據數據分析的結果,解釋雜交瘤中的DNA或RNA序列的特征、變異和功能;
當然了,對于不同公司來(lái)說(shuō),其具體的操作流程可能存在一定的差異,但是,總的來(lái)說(shuō),大體的過(guò)程相差不大,只是在一些細節操作方面存在著(zhù)一定的問(wèn)題。當然了,想要提供雜交瘤測序服務(wù)需要有相當豐富的經(jīng)驗以及技術(shù)支持,否則,很難達到具體的需求。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供雜交瘤測序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。