雜交瘤抗體制備相信大家都不陌生,當我們需要進(jìn)行單克隆抗體生產(chǎn)的時(shí)候都會(huì )使用都雜交瘤。但是我們知道,雜交瘤細胞在保存的過(guò)程中容易出現污染、基因丟失、細胞狀態(tài)比好等問(wèn)題,在后期的使用中會(huì )嚴重影響到抗體的質(zhì)量。所以,一般情況下,我們都會(huì )進(jìn)行雜交瘤測序,以保證后期外源抗體的穩定表達。
什么是雜交瘤測序?
雜交瘤測序的概念其實(shí)并不困難,主要是通過(guò)提取雜交瘤細胞中抗體基因序列,并對進(jìn)行相應的測序工作,得到所需段卡尼的核苷酸序列。當后期需要使用的時(shí)候,可以按照序列制備出相應的mRNA,然后再根據mRNA反轉錄出mDNA,之后再進(jìn)行基因序列的重組蛋白表達,最終獲得我們所需的抗體。
雜交瘤測序服務(wù)的內容具體有哪些呢?
普健生物雜交瘤測序的過(guò)程主要分為五個(gè)階段,其中的一些階段會(huì )根據實(shí)際需求進(jìn)行增減。
階段一:cDNA擴增。通過(guò)細胞裂解,擴增第一聯(lián)cDNA;
階段二:抗體基因擴增。對基因進(jìn)行預擴增,并且分階段對基因進(jìn)行特異性擴增;
階段三:基因測序。將基因可控到載體中,而后進(jìn)行相關(guān)核酸序列的測定,并對其生物學(xué)信息進(jìn)行分析;
階段四:抗體表達驗證(可選)。通過(guò)測序所得基因及逆轉錄,制備質(zhì)粒,并對基因進(jìn)行瞬時(shí)轉染,并進(jìn)行相關(guān)抗體性質(zhì)檢測;
階段五:抗體表達及純化(可選)。對所得抗體進(jìn)行純化操作;
總的來(lái)說(shuō),雜交瘤測序的意義非常重大,不僅能夠減少雜交瘤傳代過(guò)程中純在的不穩定因素,而且能夠避免因為批次不同的問(wèn)題而造成的抗體性質(zhì)不同的現象。雜交瘤測序操作,能夠有效地避免這類(lèi)情況的發(fā)生,通過(guò)重組蛋白表達的方式,獲得優(yōu)質(zhì)的抗體產(chǎn)品。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供雜交瘤測序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。