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    什么是雜交瘤測序?它的操作流程是怎樣的?

    發(fā)表時(shí)間:2023-03-06 訪(fǎng)問(wèn)次數:4494

      說(shuō)到雜交瘤測序,大家或許并不怎么熟悉,但是說(shuō)到抗體測序的話(huà),相信大家一定會(huì )非常的了解。在我們制備單克隆抗體時(shí),常常會(huì )使用到雜交瘤技術(shù),制備出的雜交瘤需要盡快凍存,但是,凍存過(guò)程中往往會(huì )出現失活的現象。所以,我們就需要對篩選出的雜交瘤細胞進(jìn)行相關(guān)測序工作。

      經(jīng)過(guò)測序后的雜交瘤,能夠知道其完整的序列,后期在制備單克隆抗體的時(shí)候,可以通過(guò)相關(guān)序列通過(guò)重組抗體來(lái)制備所需抗體。不僅能解決雜交瘤失活的現象,也能保證抗體不同批次之間的一致性。當然了,雜交瘤測序的意義不止于此。

      雜交瘤測序的流程是怎樣的呢?

      1、雜交瘤細胞RNA提取。從雜交瘤細胞中提取完整的RNA序列;

      2、RNA反轉錄。通過(guò)反轉錄,獲得完整的DNA序列;

      3、獲得抗體輕重鏈基因。通過(guò)一系列剪切提取的操作,獲得抗體重鏈/輕鏈的可變區基因;

      4、輕重鏈基因測序。通過(guò)抗體測序的手段,測定輕重鏈的基因序列;

      5、基因生物學(xué)分析。分析所得基因的生物學(xué)特性,剔除其中非功能性DNA,最終獲得我們所需抗體序列;

      6、得到抗體序列;

      相對于那些直接對抗體進(jìn)行蛋白分析從而得到基因序列的方式相比,雜交瘤測序所得的基因序列更加的準確,而且能夠有效避免了因為亮氨酸和異亮氨酸難以區分的問(wèn)題。所以,總的來(lái)說(shuō),雜交瘤測序的準確性更高,使用起來(lái)也更加的方便,也為抗體人源化的實(shí)現奠定了更好的基礎。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大該用戶(hù)提供雜交瘤測序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。

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