在接觸抗體制備時(shí),我們常常會(huì )聽(tīng)到各式各樣的名詞,其中,雜交瘤細胞這個(gè)詞的出現頻率可以說(shuō)是非常高的。為什么呢?因為我們的抗體制備方式中,最常用的就是雜交瘤細胞技術(shù)。那么,什么是雜交瘤細胞呢?這項技術(shù)的具體操作步驟又是怎樣的呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。
什么是雜交瘤細胞技術(shù)?有關(guān)雜交瘤細胞技術(shù)我們在前面和大家有聊過(guò),在“什么是雜交瘤技術(shù)?它的意義體現在哪些方面?”一文中,我們和大家具體聊過(guò)雜交瘤技術(shù)的定義以及其核心操作步驟,大家有興趣可以具體去了解一下。
而所謂的雜交瘤細胞技術(shù)就是將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞進(jìn)行融合,讓新產(chǎn)生的細胞既具備抗體制備的能力,又具備無(wú)限增殖的能力,從而能夠長(cháng)期穩定地為我們提供抗體產(chǎn)品的一項技術(shù)。
那么,雜交瘤細胞制備的具體步驟是怎樣的呢?
其實(shí)雜交瘤細胞的制備主要包含如下三個(gè)核心步驟:細胞融合、培養基選擇以及抗原特異性選擇。
1、細胞的選擇與融合
雜交瘤細胞制備的目的就是為了產(chǎn)生對應的單克隆抗體,所以,融合的細胞必須是經(jīng)過(guò)免疫后的B細胞,通常我們從脾臟中提取。產(chǎn)生的雜交瘤細胞的最佳情況是最低程度損傷細胞,而且能夠高頻率融合的細胞;
2、培養基的選擇與應用
細胞的融合存在著(zhù)極大的隨機性,所以,產(chǎn)生的細胞常常會(huì )呈現出多種形式。比如脾細胞和瘤細胞、未融合脾細胞、未融合瘤細胞及多細胞聚合體。通過(guò)培養基培養5-7天,細胞多聚體和未融合的細胞則會(huì )自動(dòng)篩除,而后,我們只需要將合格的細胞篩選出來(lái)即可;
3、抗原特異性選擇
一種抗原往往都會(huì )存在多個(gè)決定簇,而動(dòng)物免疫應答后,目標抗原的B細胞只占少數,而融合又 是一個(gè)隨機過(guò)程,所以我們需要通過(guò)篩選去除。然后再對細胞進(jìn)行克隆化,通過(guò)抗原包挑選出目標細胞株,繁殖后再進(jìn)行培養;
總的來(lái)說(shuō),雜交瘤細胞就是通過(guò)將B細胞和骨髓瘤細胞融合后的產(chǎn)物,這種“大”細胞能夠無(wú)限增殖,并且制備抗體,以達到抗體制備的需求。隨著(zhù)技術(shù)的不斷改進(jìn),雜交瘤細胞的使用相對變得少了一些,但是,現階段的很多抗體依然采用這個(gè)方式制備,相信在未來(lái)的使用中也會(huì )非常的頻繁。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)單咨詢(xún)。