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大腸桿菌作為最早用來(lái)生產(chǎn)蛋白的一種方式，為我們的健康起到了非常大的作用。如果采用大腸桿菌來(lái)作為宿主生物，它具備生長(cháng)快速、親公司那個(gè)實(shí)現以及外源DNA轉化快速等優(yōu)點(diǎn)，使得它的使用非常的廣泛。但是，我們日常在大腸桿菌生產(chǎn)的過(guò)程中嘗嘗會(huì )遇到一些小問(wèn)題，導致所產(chǎn)生的蛋白達不到我們的要求，今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊大腸桿菌重組蛋白表達。
1、質(zhì)粒的選擇
我們常說(shuō)的質(zhì)粒包括復制子、啟動(dòng)子、選擇標記、多個(gè)克隆位點(diǎn)等，因為需要選擇的選項比較多，而且表達載體的目錄比較大，所以，我們時(shí)常會(huì )出現選擇出錯的情況。這個(gè)時(shí)候，我們就需要根據個(gè)人的需求去仔細選擇，這樣才能避免相關(guān)問(wèn)題的出現;
2、復制子
復制子其實(shí)就是由一個(gè)復制起點(diǎn)和相應的順式作用控制元件所組成，而我們日常工作中想要選擇合適的載體時(shí)，最需要注意的一個(gè)重要參數就是基因拷貝數，而基因拷貝數的控制權則位于復制子中。高質(zhì)粒數量的復制子在極大程度上會(huì )造成代謝負擔的提升，可能會(huì )導致細菌的生長(cháng)速度出現降低的現象，而且可能會(huì )造成質(zhì)粒不穩定的現象，最終導致用于蛋白合成的健康生物數量下降;
3、其他可能遇到的問(wèn)題
雖然說(shuō)現在可以通過(guò)一定的手段來(lái)實(shí)現在短期內處理數百種蛋白，但是這項技術(shù)存在著(zhù)一定的局限性，需要在后期的實(shí)驗中不斷改進(jìn)。而且對于大部分的實(shí)驗室來(lái)說(shuō)，自動(dòng)化平臺相對昂貴，價(jià)格相對來(lái)說(shuō)難以承受;
總的來(lái)說(shuō)，大腸桿菌蛋白表達所具備的優(yōu)勢是無(wú)與倫比的，因為其周期短、操作簡(jiǎn)單、失敗率低的情況，只要我們做好相應的準備工作，按照程序來(lái)設計，這樣就能在極大程度上降低其失敗的情況。更多蛋白表達的相關(guān)知識，敬請關(guān)注普健生物。
