蛋白提取分離過(guò)程中的細胞破碎的詳細步驟

　　當我們需要進(jìn)行細胞內部蛋白提取需求時(shí)，我們就需要對蛋白進(jìn)行破碎操作(有關(guān)細胞提取和分離的過(guò)程可以在“蛋白純化之前常用的一些提取和分離方法簡(jiǎn)介”一問(wèn)查看)。那么，細胞破碎具體有哪些方法呢?下面普健生物就和大家一一介紹。

　　對于細胞破碎的方法，我們需要提前考慮破碎的目的和獨享類(lèi)型。細胞的類(lèi)型、大小、形態(tài)、生長(cháng)條件、細胞壁結構以及溫度換、PH值等都需要考慮到，綜合這些特性，才能找出最合適的方法。因為在破碎的過(guò)程中會(huì )產(chǎn)生熱量，需要提前準備好冷卻樣品。而且細胞一旦破碎，就會(huì )失去代謝調節機制的控制，目的蛋白可能會(huì )受到蛋白酶的影響。這個(gè)時(shí)候我們就需要迅速提取出來(lái)，或者加入抑制劑，或通過(guò)低溫來(lái)降低蛋白酶的作用。

　　如下，就是普健生物為大家總結的幾種常用的細胞破碎方法及其優(yōu)缺點(diǎn)。

　　1、超聲波法。通過(guò)強烈的超聲波迅速造成大量細胞破裂，破裂效果非常好，而且所需的樣品數量少，使用最為廣泛，但是不適合用來(lái)進(jìn)行大規模的細胞破裂，而且對溫度控制要求較高;

　　2、高速珠磨法。采用高速珠磨碎細胞，可以快速有效地破裂細胞，但是破碎的條件相對難以掌握;

　　3、高壓勻漿法。通過(guò)驟然改變細胞的碰撞、壓力等方式，來(lái)實(shí)現細胞的被動(dòng)破裂，可以用于大規模的操作，使用非常的廣泛，但是對于那些與細胞膜結合的蛋白來(lái)說(shuō)，需要進(jìn)行多次破碎才能實(shí)現;

　　4、凍融法。將細胞置于-15度的環(huán)境下冷凍，然后再在室溫下解凍，通過(guò)解凍的過(guò)程破碎細胞。這個(gè)方法只適合那些細胞壁脆弱的類(lèi)型，破碎率較低，而且容易造成蛋白失活(通常需要大量的時(shí)間);

　　5、酶解法。通過(guò)合適的酶來(lái)控制細胞的破裂，需要相對溫和的條件，而且專(zhuān)一性強，無(wú)法實(shí)現工業(yè)化生產(chǎn);

　　如上就是普健生物為大家總結的有關(guān)細胞破裂的幾種操作方法，這些方法都能在一定程度上對細胞進(jìn)行破裂。但是很多方法只適合實(shí)驗室使用，無(wú)法實(shí)現大規模工業(yè)化的生產(chǎn)。不過(guò)，相信在不久的未來(lái)，更多更優(yōu)質(zhì)的方法將會(huì )被發(fā)明出來(lái)。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。