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在“重組蛋白之蛋白純化的原理與步驟”一文中，我們和大家詳細介紹了蛋白純化的相關(guān)原理和具體步驟，相信大家對蛋白純化也有了初步的了解。那么，有關(guān)重組蛋白純化的方法您了解多少呢?今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊。
我們知道，不同的蛋白在物理、化學(xué)、生物活性等方面都有著(zhù)極大的不同，因為其氨基酸序列和數量的不同，連接氨基酸殘基可能是荷正電也可能是荷負電的、極性或是非極性的、親水或是疏水的。所以，我們完全可以根據它們的這些特點(diǎn)來(lái)對其進(jìn)行相關(guān)純化工作。
方法一：超速離心法
超速離心法主要用于分離亞細胞和蛋白，利用個(gè)例子在梯度液中沉降速度不同的原理，使得不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層中，從而達到分離的目的;
方法二：選擇性沉淀法
選擇性沉淀法其實(shí)就是利用各種沉淀劑或者通過(guò)改變某些條件來(lái)促使分層沉淀，進(jìn)而實(shí)現蛋白的純化。
常用的方法有鹽析沉淀法、有機溶劑沉淀法、水溶性非離子型聚合物沉淀法等方法來(lái)實(shí)現蛋白純化操作，具體方式及其優(yōu)劣我們將在后文中和大家詳細介紹;
方法三：凝膠層析法
凝膠層析法也被稱(chēng)為分子篩過(guò)濾法，其實(shí)就是利用分子大小的不同，將蛋白分離出來(lái)。相比其他方法來(lái)說(shuō)，凝膠沉淀法操作相對溫和，對蛋白造成的影響相對要小一些;
方法四：離子交換層析法
離子交換層析法是利用分子所含電荷的吸附作用不同來(lái)實(shí)現。我們和大家提到過(guò)，蛋白的等電點(diǎn)不同，其所帶電荷量也是各不相同的，所以，通過(guò)在纖維素上加入電荷位置，從而實(shí)現吸附蛋白的效果;
方法五：親和層析法
親和層析法其實(shí)就是利用生物大分子的特異性，類(lèi)似親和力結合的方式來(lái)實(shí)現蛋白的吸附;
總的來(lái)說(shuō)，上面五種方法所針對的方面不同，其實(shí)也是針對各類(lèi)蛋白在大小、特性等方面的不同來(lái)實(shí)現蛋白的純化操作。對于不同的純化需求來(lái)說(shuō)，五種方法可謂各具優(yōu)勢，需要有選擇地進(jìn)行選擇。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
