重組蛋白表達之蛋白的生長(cháng)與誘導

　　在我們使用大腸桿菌表達重組蛋白時(shí)，我們需要確定其的產(chǎn)生、定位、培養基以及產(chǎn)量進(jìn)行確定，以便于其后期簡(jiǎn)化工作的進(jìn)行。所以，我們不僅需要對蛋白、培養液等物質(zhì)進(jìn)行小規模地分析。對于那些分析出來(lái)有利于誘導的條件進(jìn)行保留，并選擇合適的方法對其進(jìn)行目的蛋白純化。

　　如何對重組蛋白的生長(cháng)和誘導?

　　1、按需求準備pET重組子培養液。直接從經(jīng)辦或甘油保存菌中提取一些細胞加入到抗生素培養液中;

　　2、在37度環(huán)境下對培養基進(jìn)行培養。提取3ml培養液，并將其加入到含有抗生素的100ml培養液中;

　　3、在搖床上進(jìn)行無(wú)菌培養。在適當溫度下降培養基放在搖床上培養2-3小時(shí)，在培養過(guò)程中要不定期地提取樣品進(jìn)行檢測;

　　4、分批次培養。在進(jìn)行誘導之前，需要將培養液分成兩份，一份加入IPTG，另一份不加，通過(guò)對照，看其具體差異。然后，保持其在適當溫度下進(jìn)行培養;

　　總的來(lái)說(shuō)，重組蛋白進(jìn)行誘導表達時(shí)，不僅要測試好相應的培養環(huán)境，更是需要進(jìn)行不同批次的檢測和對比，這樣才能保證最佳的制備環(huán)境。當然了，對于不同的蛋白，需要提供不同的環(huán)境，這樣才能在更大程度上保證蛋白的表達。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。