重組蛋白表達在現代生命科學(xué)研究中起著(zhù)重要的作用,能夠為我們在表達量以及表達質(zhì)量上帶來(lái)非常大的幫助。通常情況下,重組蛋白是通過(guò)將外源基因導入到宿主細胞內,隨著(zhù)細胞蛋白的表達而表達。目前,重組蛋白表達主要通過(guò)五大表達系統來(lái)實(shí)現表達和純化。
什么是重組蛋白表達?
重組蛋白表達是利用DNA重組技術(shù),將目標基因導入到宿主細胞中,通過(guò)宿主的生物機制表達出所需蛋白。通過(guò)基因克隆,將基因擴增后形成重組質(zhì)粒,將質(zhì)粒導入到宿主細胞中(使用化學(xué)方法、電穿孔或者嗜熱菌等方法進(jìn)行轉染),而后將細胞進(jìn)行目的蛋白表達;
重組蛋白表達有哪幾種類(lèi)型呢?
1、融合表達
通過(guò)將目的蛋白基因序列構建到表達載體中,由相同的調控原件進(jìn)行融合表達;
2、非融合表達
這個(gè)方法與融合表達相對,所得目的蛋白不與任何蛋白標簽進(jìn)行融合表達,不過(guò)這個(gè)方法會(huì )因為宿主中的蛋白酶而降解,從而失去活性;
3、胞內表達
就重組蛋白表達而言,大多數的目的蛋白都以胞內表達實(shí)現,當然了,有些時(shí)候,在胞內表達時(shí),會(huì )因為細胞內部的原因導致蛋白結構發(fā)生影響。這個(gè)時(shí)候,我們就需要借助分泌信號肽等蛋白標簽來(lái)實(shí)現表達;
4、分泌表達
所謂的分泌表達也就是我們常說(shuō)的胞外表達,這種表達方式更適合于蛋白的純化,也比較穩定不易降解;
當然了,就溶解性而言,重組蛋白表達也可以分為可溶性表達和非可溶性表達,也就是我們常說(shuō)的是否會(huì )形成包涵體。雖然說(shuō)現階段的重組蛋白表達技術(shù)存在著(zhù)一定的不足之處,但是,其所能帶來(lái)的好處是不言而喻的。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組蛋白表達服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。