蛋白純化過(guò)程中鎳柱純化的原理及具體步驟

　　蛋白純化過(guò)程中常常會(huì )使用到各種方法，通過(guò)特異性吸附或者滲透壓等方式提升蛋白純度，鎳柱純化就是其中最常用的方式之一。下面，普健生物和大家具體聊聊有關(guān)鎳柱純化的相關(guān)原理和具體步驟。

　　蛋白鎳柱純化的原理：

　　通過(guò)使用鎳柱和His標簽之間的親和力來(lái)實(shí)現蛋白純化的過(guò)程。當蛋白經(jīng)過(guò)鎳離子濾膜時(shí)，他們會(huì )和鎳離子結合，形成鎳-蛋白復合物，這樣，就能將蛋白從溶液中分離出來(lái)。而后，再通過(guò)洗脫液將鎳離子和蛋白分開(kāi)，從而獲得所需蛋白;

　　鎳離子蛋白純化的具體步驟：

　　1、通過(guò)將氯化鎳倒入柱子中，平衡好柱子，以提供蛋白最適宜的環(huán)境;

　　2、平衡4個(gè)柱子后放入蛋白中，可以讓蛋白自動(dòng)掛上鎳柱上，這樣效果也會(huì )更好。需要控制好流速，且可以循環(huán)掛柱;

　　3、掛完后，需要加入咪唑來(lái)洗脫。一般來(lái)說(shuō)，咪唑會(huì )搶奪Ni的結合點(diǎn)，會(huì )將蛋白洗脫下來(lái);

　　4、而后可以多洗脫幾次，這樣就能獲得純度更高的蛋白;

　　總的來(lái)說(shuō)，采用鎳柱純化蛋白能夠在一定程度上提升蛋白的純度，但是也只能在一定程度上提升純度。不過(guò)隨著(zhù)技術(shù)的不斷發(fā)展，相信未來(lái)蛋白的純度會(huì )越來(lái)越高，相關(guān)成本也會(huì )越來(lái)越低。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎前來(lái)咨詢(xún)。