我們在進(jìn)行蛋白表達時(shí),往往會(huì )涉及到一個(gè)概念:蛋白可溶性。它的意思是說(shuō),蛋白可溶于溶液中的分量。我們知道,蛋白只有溶于溶液中時(shí)才會(huì )發(fā)生作用,析出的蛋白則無(wú)法發(fā)生反應,所以,蛋白的可溶性在極大程度上制約著(zhù)蛋白的功能。那么,有沒(méi)有什么辦法來(lái)提升蛋白的可溶性呢?今天,普健生物就和大家具體聊聊。
1、選擇可溶性更高的工程菌
蛋白是否可溶,在很大程度上取決于其二硫鍵以及是否能夠正確折疊的問(wèn)題。所以,我們可以選擇那些有利于二硫鍵形成的宿主菌,這樣更有利于蛋白的表達;
2、添加一些促溶的標簽
根據蛋白的特性,有意識地加入一些能夠促進(jìn)蛋白可溶性的標簽;
3、伴侶表達
在進(jìn)行工程菌表達時(shí),可以同時(shí)加入一個(gè)能夠表達伴侶蛋白的質(zhì)粒,這個(gè)伴侶蛋白不能與表達外源蛋白的質(zhì)粒出現質(zhì)粒不相容的情況。然后,在結合實(shí)際情況來(lái)確定表達伴侶蛋白的質(zhì)粒;
4、選擇合適的啟動(dòng)子
蛋白可溶性的強弱也和啟動(dòng)子的選擇有著(zhù)極大的關(guān)系,強啟動(dòng)子不僅能提升蛋白產(chǎn)量,同時(shí)也增強了包涵體的形成,從而提升蛋白的可溶性;
5、優(yōu)化蛋白的培養條件
通過(guò)優(yōu)化蛋白的表達環(huán)境,比如:誘導溫度、誘導劑濃度、誘導時(shí)間等,同時(shí)還可以通過(guò)優(yōu)化培養基內的營(yíng)養物質(zhì)等來(lái)提升蛋白的表達;
對于不同的公司來(lái)說(shuō),提升表達蛋白可溶性方法有很多,而且各不相同,但是,這些方法都是在實(shí)驗過(guò)程中不斷總結所得,能夠應對絕大部分蛋白表達的問(wèn)題。自然了,蛋白表達經(jīng)驗越多的公司,其應對蛋白表達問(wèn)題的方法也越多,也越好。普健生物作為一家擁有10余年蛋白抗體定制表達經(jīng)驗的公司,專(zhuān)業(yè)為你聽(tīng)蛋白表達服務(wù),如果您有需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。