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作為生命的主要承擔者，蛋白一直是科研項目中備受關(guān)注的一員。在生命體中，蛋白一直都不是單一運作的，往往需要很多蛋白共同配合來(lái)完場(chǎng)一個(gè)動(dòng)作。這個(gè)時(shí)候，人們就提出了一個(gè)新的理念：蛋白互作?，F階段的蛋白互作技術(shù)您了解多少?下面，普健生物和大家具體聊聊。
什么是蛋白互作?
蛋白互作(PPls)其實(shí)就是一相細胞的基礎事件，他發(fā)生在細胞結構和細胞器的每一個(gè)生理過(guò)程中，蛋白之間的配合、作用，最終完成細胞所需的一次生理周期過(guò)程。
蛋白互作分析的意義?
蛋白互作分析能夠闡明蛋白質(zhì)的相互作用在何時(shí)、何地發(fā)生以及蛋白質(zhì)復合物如何形成為確定蛋白質(zhì)生物學(xué)功能提供了重要基礎?？梢哉f(shuō)，通過(guò)這項技術(shù)，我們能夠更好地對細胞進(jìn)行研究，以便于進(jìn)一步了解生命。
那么，蛋白互作分析的方法有哪些呢?
就目前而言，常用的蛋白互作分析方法主要有四種，具體如下：
1、親和純化及免疫共沉淀
免疫共沉淀技術(shù)簡(jiǎn)稱(chēng)COIP技術(shù)，是通過(guò)抗原抗體之間的特異性結合原理完成，通過(guò)在細胞裂解液中添加特異性抗體，使得抗原和抗體形成沉淀，而后在通過(guò)復合物觀(guān)察并驗證抗原與其他蛋白之間相互作用的方法;
這個(gè)方法能真實(shí)檢測體內的生理情況，實(shí)驗條件溫和，并且可以分離到天然狀態(tài)的蛋白化合物。但是對于那些結合力弱的蛋白來(lái)說(shuō)，效果就顯得差強人意了;
2、Pull Down
Pull-Down技術(shù)，其實(shí)就是利用相對固化并且標記過(guò)后的標簽蛋白從細胞裂解液中釣出與之相對應的蛋白的方法。而后通過(guò)對那些被“釣”出來(lái)蛋白進(jìn)行研究，從而確定蛋白之間相互作用的關(guān)系。
3、雙分子熒光互補
雙分子熒光互補技術(shù)指的是通過(guò)將熒光蛋白的多肽鏈在不保守的氨基酸處切開(kāi)，形成兩個(gè)多肽片段，而后將這兩個(gè)多肽片段分別鏈接到一對能發(fā)生互補作用的目標蛋白上。當這兩個(gè)蛋白相互作用時(shí)，會(huì )造成兩個(gè)分開(kāi)的熒光蛋白互補，從而發(fā)出熒光;
4、酵母雙雜交實(shí)驗
酵母雙雜系統是當前使用最為廣泛的一種方法，它通過(guò)將靶蛋白和誘導蛋白特異性結合，誘餌蛋白結合于報道基因的啟動(dòng)子,啟動(dòng)報道基因在酵母細胞內的表達,如果檢測到報道基因的表達產(chǎn)物,則說(shuō)明兩者之間有相互作用,反之則兩者之間沒(méi)有相互作用;
這四種方法各具特色，適合于不同的使用環(huán)境，我們在進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗的時(shí)候，可以結合當前的情況選擇最適合的方法。武漢普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白抗體表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
